Особенности эпителиально-мезенхимального перехода, вызываемого драйверными мутациями сигнального пути PI3K/AKT в эпителиальных клетках молочной железы

Аннотация

Сигнальный путь PI3K/AKT является одним из важнейших в клетке и вовлечен в регуляцию пролиферации, выживания и миграции клеток. Мутации участников PI3K/AKT-пути часто связаны с прогрессией и метастазированием злокачественных опухолей. Начальным этапом метастазирования является эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП), при котором опухолевые клетки приобретают способность к миграции. Литературные данные о влиянии драйверных мутаций PI3K/AKT-пути на миграционные способности опухолевых клеток противоречивы. Мы рассмотрели изменение подвижности и ЭМП эпителиальных клеток молочной железы под влиянием четырех драйверных мутаций, затрагивающих разные уровни регуляторного пути PI3K/AKT и часто выявляемых при развитии злокачественных опухолей. Анализ подвижности клеток, экспрессии маркеров ЭМП и морфологии межклеточных контактов показал, что все эти мутации приводят к инициации неполного ЭМП, так как во всех изученных линиях сохраняется экспрессия Е‑кадгерина и клетки сохраняют межклеточные контакты. Мы проанализировали типы ЭМП, вызванных разными мутациями, и показали, что ускорение миграции не определяется степенью прогрессии ЭМП по направлению к мезенхимальному фенотипу. Так, наибольшее увеличение миграционных способностей клеток отмечено при мутации PIK3CA H1047R/+, которая приводит к наиболее выраженному мезенхимальному фенотипу, и при нокауте PTEN, который сохраняет наиболее эпителиальный фенотип. Анализ показал, что наибольшее влияние на ЭМП и клеточную подвижность оказывают те мутации, которые опосредованно влияют на активность регуляторного пути MAPK/ERK и усиливают активацию ERK.

Сноски

* Адресат для корреспонденции.

# Авторы внесли равный вклад в работу.

Вклад авторов

А.М. Готро, А.Ю. Александрова – концепция и руководство работой; А. Даюб, А.О. Жолудева, А.И. Фокин, А.С. Ильницкая – проведение экспериментов; А.О. Жолудева, М.Е. Ломакина, А.Ю. Александрова – написание текста; А. Даюб, А.О. Жолудева, М.Е. Ломакина, А.Ю. Александрова – редактирование текста статьи.

Финансирование

Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 252500454).

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Соблюдение этических норм

Настоящая статья не содержит описания каких-либо исследований с использованием людей или животных в качестве объектов.

Список литературы

1. Yeung, K. T., and Yang, J. (2017) Epithelial-mesenchymal transition in tumor metastasis, Mol. Oncol., 11, 28-39, https://doi.org/10.1002/1878-0261.12017.

2. Liao, T. T., and Yang, M. H. (2017) Revisiting epithelial-mesenchymal transition in cancer metastasis: the connection between epithelial plasticity and stemness, Mol. Oncol., 11, 792-804, https://doi.org/10.1002/1878-0261.12096.

3. Campbell, K. (2018) Contribution of epithelial-mesenchymal transitions to organogenesis and cancer metastasis, Curr. Opin. Cell Biol., 55, 30-35, https://doi.org/10.1016/j.ceb.2018.06.008.

4. Kalluri, R., and Weinberg, R. A. (2009) The basics of epithelial-mesenchymal transition, J. Clin. Invest., 119, 1420-1428, https://doi.org/10.1172/JCI39104.

5. Cowin, P., Rowlands, T. M., and Hatsell, S. J. (2005) Cadherins and catenins in breast cancer, Curr. Opin. Cell Biol., 17, 499-508, https://doi.org/10.1016/j.ceb.2005.08.014.

6. Lamouille, S., Xu, J., and Derynck, R. (2014) Molecular mechanisms of epithelial-mesenchymal transition, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 15, 178-196, https://doi.org/10.1038/nrm3758.

7. Puisieux, A., Brabletz, T., and Caramel, J. (2014) Oncogenic roles of EMT-inducing transcription factors, Nat. Cell Biol., 16, 488-494, https://doi.org/10.1038/ncb2976.

8. Mahmoudian, R. A., Akhlaghipour, I., Lotfi, M., Shahidsales, S., and Moghbeli, M. (2023) Circular RNAs as the pivotal regulators of epithelial-mesenchymal transition in gastrointestinal tumor cells, Pathol. Res. Pract., 245, 154472, https://doi.org/10.1016/j.prp.2023.154472.

9. Thiery, J. P., Acloque, H., Huang, R. Y., and Nieto, M. A. (2009) Epithelial-mesenchymal transitions in development and disease, Cell, 139, 871-890, https://doi.org/10.1016/j.cell.2009.11.007.

10. Chen, T., You, Y., Jiang, H., and Wang, Z. Z. (2017) Epithelial-mesenchymal transition (EMT): A biological process in the development, stem cell differentiation, and tumorigenesis, J. Cell Physiol., 232, 3261-3272, https://doi.org/10.1002/jcp.25797.

11. Dongre, A., and Weinberg, R. A. (2019) New insights into the mechanisms of epithelial-mesenchymal transition and implications for cancer, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 20, 69-84, https://doi.org/10.1038/s41580-018-0080-4.

12. Mnikhovich, M., Bezuglova, T., Bunkov, K., Zorin, S., Romanov, A., Mishina, E., and Skafi, K. (2022) Role epithelial – mesenchymal transition in formation of metastatic potential of a malignant tumor on the example of a breast cancer, Vopr. Oncol., 68, 251-259, https://doi.org/10.37469/0507-3758-2022-68-3-251-259.

13. Fruman, D. A., Chiu, H., Hopkins, B. D., Bagrodia, S., Cantley, L. C., and Abraham, R. T. (2017) The PI3K pathway in human disease, Cell, 170, 605-635, https://doi.org/10.1016/j.cell.2017.07.029.

14. Chetram, M. A., and Hinton, C. V. (2012) PTEN regulation of ERK1/2 signaling in cancer, J. Recept Signal Transduct. Res., 32, 190-195, https://doi.org/10.3109/10799893.2012.695798.

15. Moghbeli, M. (2024) PI3K/AKT pathway as a pivotal regulator of epithelial-mesenchymal transition in lung tumor cells, Cancer Cell Int., 24, 165, https://doi.org/10.1186/s12935-024-03357-7.

16. Larue, L., and Bellacosa, A. (2005) Epithelial-mesenchymal transition in development and cancer: role of phosphatidylinositol 3′ kinase/AKT pathways, Oncogene, 24, 7443-7454, https://doi.org/10.1038/sj.onc.1209091.

17. Vanhaesebroeck, B., Guillermet-Guibert, J., Graupera, M., and Bilanges, B. (2010) The emerging mechanisms of isoform-specific PI3K signalling, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 11, 329-341, https://doi.org/10.1038/nrm2882.

18. Jiang, W., and Ji, M. (2019) Receptor tyrosine kinases in PI3K signaling: the therapeutic targets in cancer, Semin. Cancer Biol., 59, 3-22, https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.03.006.

19. Rascio, F., Spadaccino, F., Rocchetti, M. T., Castellano, G., Stallone, G., Netti, G. S., and Ranieri, E. (2021) The pathogenic role of PI3K/AKT pathway in cancer onset and drug resistance: an updated review, Cancers, 13, 3949, https://doi.org/10.3390/cancers13163949.

20. Bhat-Nakshatri, P., Goswami, C. P., Badve, S., Magnani, L., Lupien, M., and Nakshatri, H. (2016) Molecular insights of pathways resulting from two common PIK3CA mutations in breast cancer, Cancer Res., 76, 3989-4001, https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-15-3174.

21. Martincorena, I., Raine, K. M., Gerstung, M., Dawson, K. J., Haase, K., Van Loo, P., Davies, H., Stratton, M. R., and Campbell, P. J. (2017) Universal patterns of selection in cancer and somatic tissues, Cell, 171, 1029-1041.e1021, https://doi.org/10.1016/j.cell.2017.09.042.

22. Martinez-Jimenez, F., Muinos, F., Sentis, I., Deu-Pons, J., Reyes-Salazar, I., Arnedo-Pac, C., Mularoni, L., Pich, O., Bonet, J., Kranas, H., Gonzalez-Perez, A., and Lopez-Bigas, N. (2020) A compendium of mutational cancer driver genes, Nat. Rev. Cancer, 20, 555-572, https://doi.org/10.1038/s41568-020-0290-x.

23. Martinez-Jimenez, F., Muinos, F., Lopez-Arribillaga, E., Lopez-Bigas, N., and Gonzalez-Perez, A. (2020) Systematic analysis of alterations in the ubiquitin proteolysis system reveals its contribution to driver mutations in cancer, Nat. Cancer, 1, 122-135, https://doi.org/10.1038/s43018-019-0001-2.

24. Weghorn, D., and Sunyaev, S. (2017) Bayesian inference of negative and positive selection in human cancers, Nat. Genet., 49, 1785-1788, https://doi.org/10.1038/ng.3987.

25. Dietlein, F., Weghorn, D., Taylor-Weiner, A., Richters, A., Reardon, B., Liu, D., Lander, E. S., Van Allen, E. M., and Sunyaev, S. R. (2020) Identification of cancer driver genes based on nucleotide context, Nat. Genet., 52, 208-218, https://doi.org/10.1038/s41588-019-0572-y.

26. Arnedo-Pac, C., Mularoni, L., Muinos, F., Gonzalez-Perez, A., and Lopez-Bigas, N. (2019) OncodriveCLUSTL: a sequence-based clustering method to identify cancer drivers, Bioinformatics, 35, 5396, https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btz588.

27. Mularoni, L., Sabarinathan, R., Deu-Pons, J., Gonzalez-Perez, A., and Lopez-Bigas, N. (2016) OncodriveFML: a general framework to identify coding and non-coding regions with cancer driver mutations, Genome Biol., 17, 128, https://doi.org/10.1186/s13059-016-0994-0.

28. Burke, J. E., and Williams, R. L. (2015) Synergy in activating class I PI3Ks, Trends Biochem. Sci., 40, 88-100, https://doi.org/10.1016/j.tibs.2014.12.003.

29. Lv, W., Du, C., Zhang, Y., Wu, F., Jin, Y., Chen, X., Liu, X., Feng, C., Ma, X., and Zhang, S. (2022) Clinicopathological characteristics and prognostic analysis of PIK3CA mutation in breast cancer patients in Northwest China, Pathol. Res. Pract., 238, 154063, https://doi.org/10.1016/j.prp.2022.154063.

30. Carpten, J. D., Faber, A. L., Horn, C., Donoho, G. P., Briggs, S. L., Robbins, C. M., Hostetter, G., Boguslawski, S., Moses, T. Y., Savage, S., Uhlik, M., Lin, A., Du, J., Qian, Y. W., Zeckner, D. J., Tucker-Kellogg, G., Touchman, J., Patel, K., Mousses, S., Bittner, M., et al. (2007) A transforming mutation in the pleckstrin homology domain of Akt1 in cancer, Nature, 448, 439-444, https://doi.org/10.1038/nature05933.

31. Maehama, T., and Dixon, J. E. (1998) The tumor suppressor, PTEN/MMAC1, dephosphorylates the lipid second messenger, phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate, J. Biol. Chem., 273, 13375-13378, https://doi.org/10.1074/jbc.273.22.13375.

32. Wang, H., Tang, R., Jiang, L., and Jia, Y. (2024) The role of PIK3CA gene mutations in colorectal cancer and the selection of treatment strategies, Front. Pharmacol., 15, 1494802, https://doi.org/10.3389/fphar.2024.1494802.

33. Ghodsinia, A. A., Lego, J. M. T., and Garcia, R. L. (2020) Mutation-associated phenotypic heterogeneity in novel and canonical PIK3CA helical and kinase domain mutants, Cells, 9, 1116, https://doi.org/10.3390/cells9051116.

34. Gjelaj, E., and Hamel, P. A. (2021) Distinct epithelial-to-mesenchymal transitions induced by PIK3CA(H1047R) and PIK3CB, J. Cell Sci., 134, jcs248294, https://doi.org/10.1242/jcs.248294.

35. Wallin, J. J., Guan, J., Edgar, K. A., Zhou, W., Francis, R., Torres, A. C., Haverty, P. M., Eastham-Anderson, J., Arena, S., Bardelli, A., Griffin, S., Goodall, J. E., Grimshaw, K. M., Hoeflich, K. P., Torrance, C., Belvin, M., and Friedman, L. S. (2012) Active PI3K pathway causes an invasive phenotype which can be reversed or promoted by blocking the pathway at divergent nodes, PLoS One, 7, e36402, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0036402.

36. Raghuram, N., Temel, E. I., Kawamata, T., Kozma, K. J., Loch, A. J., Wang, W., Adams, J. R., Muller, W. J., and Egan, S. E. (2024) Elevated expression of wildtype RhoC promotes ErbB2- and Pik3ca-induced mammary tumor formation, Breast Cancer Res., 26, 86, https://doi.org/10.1186/s13058-024-01842-5.

37. Meyer, D. S., Koren, S., Leroy, C., Brinkhaus, H., Muller, U., Klebba, I., Muller, M., Cardiff, R. D., and Bentires-Alj, M. (2013) Expression of PIK3CA mutant E545K in the mammary gland induces heterogeneous tumors but is less potent than mutant H1047R, Oncogenesis, 2, e74, https://doi.org/10.1038/oncsis.2013.38.

38. Dogruluk, T., Tsang, Y. H., Espitia, M., Chen, F., Chen, T., Chong, Z., Appadurai, V., Dogruluk, A., Eterovic, A. K., Bonnen, P. E., Creighton, C. J., Chen, K., Mills, G. B., and Scott, K. L. (2015) Identification of variant-specific functions of PIK3CA by rapid phenotyping of rare mutations, Cancer Res., 75, 5341-5354, https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-15-1654.

39. Zhao, S., Cao, Y., Liu, S. B., Wang, X. A., Bao, R. F., Shu, Y. J., Hu, Y. P., Zhang, Y. J., Jiang, L., Zhang, F., Liang, H. B., Li, H. F., Ma, Q., Xu, Y., Wang, Z., Zhang, Y. C., Chen, L., Zhou, J., and Liu, Y. B. (2016) The E545K mutation of PIK3CA promotes gallbladder carcinoma progression through enhanced binding to EGFR, J. Exp. Clin. Cancer Res., 35, 97, https://doi.org/10.1186/s13046-016-0370-7.

40. Barbareschi, M., Buttitta, F., Felicioni, L., Cotrupi, S., Barassi, F., Del Grammastro, M., Ferro, A., Dalla Palma, P., Galligioni, E., and Marchetti, A. (2007) Different prognostic roles of mutations in the helical and kinase domains of the PIK3CA gene in breast carcinomas, Clin. Cancer Res., 13, 6064-6069, https://doi.org/10.1158/1078-0432.Ccr-07-0266.

41. Pang, H., Flinn, R., Patsialou, A., Wyckoff, J., Roussos, E. T., Wu, H., Pozzuto, M., Goswami, S., Condeelis, J. S., Bresnick, A. R., Segall, J. E., and Backer, J. M. (2009) Differential enhancement of breast cancer cell motility and metastasis by helical and kinase domain mutations of class IA phosphoinositide 3-kinase, Cancer Res., 69, 8868-8876, https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-09-1968.

42. Kao, S. H., Wang, W. L., Chen, C. Y., Chang, Y. L., Wu, Y. Y., Wang, Y. T., Wang, S. P., Nesvizhskii, A. I., Chen, Y. J., Hong, T. M., and Yang, P. C. (2014) GSK3beta controls epithelial-mesenchymal transition and tumor metastasis by CHIP-mediated degradation of Slug, Oncogene, 33, 3172-3182, https://doi.org/10.1038/onc.2013.279.

43. Vichalkovski, A., Gresko, E., Hess, D., Restuccia, D. F., and Hemmings, B. A. (2010) PKB/AKT phosphorylation of the transcription factor Twist-1 at Ser42 inhibits p53 activity in response to DNA damage, Oncogene, 29, 3554-3565, https://doi.org/10.1038/onc.2010.115.

44. Silva, B. S., Yamamoto, F. P., Pontes, F. S., Cury, S. E., Fonseca, F. P., Pontes, H. A., and Pinto-Junior, D. D. (2012) TWIST and p-Akt immunoexpression in normal oral epithelium, oral dysplasia and in oral squamous cell carcinoma, Med. Oral Patol. Oral Cir. Bucal, 17, e29-e34, https://doi.org/10.4317/medoral.17344.

45. Kim, C. J., Sakamoto, K., Tambe, Y., and Inoue, H. (2011) Opposite regulation of epithelial-to-mesenchymal transition and cell invasiveness by periostin between prostate and bladder cancer cells, Int. J. Oncol., 38, 1759-1766, https://doi.org/10.3892/ijo.2011.997.

46. Xu, W., Yang, Z., and Lu, N. (2015) A new role for the PI3K/Akt signaling pathway in the epithelial-mesenchymal transition, Cell Adh. Migr., 9, 317-324, https://doi.org/10.1080/19336918.2015.1016686.

47. Yoeli-Lerner, M., Yiu, G. K., Rabinovitz, I., Erhardt, P., Jauliac, S., and Toker, A. (2005) Akt blocks breast cancer cell motility and invasion through the transcription factor NFAT, Mol. Cell, 20, 539-550, https://doi.org/10.1016/j.molcel.2005.10.033.

48. Liu, H., Radisky, D. C., Nelson, C. M., Zhang, H., Fata, J. E., Roth, R. A., and Bissell, M. J. (2006) Mechanism of Akt1 inhibition of breast cancer cell invasion reveals a protumorigenic role for TSC2, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103, 4134-4139, https://doi.org/10.1073/pnas.0511342103.

49. Gao, S. P., Kiliti, A. J., Zhang, K., Vasani, N., Mao, N., Jordan, E., Wise, H. C., Shrestha Bhattarai, T., Hu, W., Dorso, M., Rodrigues, J. A., Kim, K., Hanrahan, A. J., Razavi, P., Carver, B., Chandarlapaty, S., Reis-Filho, J. S., Taylor, B. S., and Solit, D. B. (2021) AKT1 E17K inhibits cancer cell migration by abrogating beta-catenin signaling, Mol. Cancer Res., 19, 573-584, https://doi.org/10.1158/1541-7786.MCR-20-0623.

50. Iqbal, J., Thike, A. A., Cheok, P. Y., Tse, G. M., and Tan, P. H. (2012) Insulin growth factor receptor-1 expression and loss of PTEN protein predict early recurrence in triple-negative breast cancer, Histopathology, 61, 652-659, https://doi.org/10.1111/j.1365-2559.2012.04255.x.

51. Noh, W. C., Kim, Y. H., Kim, M. S., Koh, J. S., Kim, H. A., Moon, N. M., and Paik, N. S. (2008) Activation of the mTOR signaling pathway in breast cancer and its correlation with the clinicopathologic variables, Breast Cancer Res. Treat., 110, 477-483, https://doi.org/10.1007/s10549-007-9746-x.

52. Alvarez-Garcia, V., Tawil, Y., Wise, H. M., and Leslie, N. R. (2019) Mechanisms of PTEN loss in cancer: it’s all about diversity, Semin. Cancer Biol., 59, 66-79, https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.02.001.

53. Qi, Y., Liu, J., Chao, J., Scheuerman, M. P., Rahimi, S. A., Lee, L. Y., and Li, S. (2020) PTEN suppresses epithelial-mesenchymal transition and cancer stem cell activity by downregulating Abi1, Sci. Rep., 10, 12685, https://doi.org/10.1038/s41598-020-69698-1.

54. Chiang, K. C., Hsu, S. Y., Lin, S. J., Yeh, C. N., Pang, J. H., Wang, S. Y., Hsu, J. T., Yeh, T. S., Chen, L. W., Kuo, S. F., Cheng, Y. C., and Juang, H. H. (2016) PTEN insufficiency increases breast cancer cell metastasis in vitro and in vivo in a xenograft zebrafish model, Anticancer Res., 36, 3997-4005.

55. Peglion, F., Capuana, L., Perfettini, I., Boucontet, L., Braithwaite, B., Colucci-Guyon, E., Quissac, E., Forsberg-Nilsson, K., Llense, F., and Etienne-Manneville, S. (2022) PTEN inhibits AMPK to control collective migration, Nat. Commun., 13, 4528, https://doi.org/10.1038/s41467-022-31842-y.

56. Dayoub, A., Fokin, A. I., Lomakina, M. E., James, J., Plays, M., Jacquin, T., Novikov, N. M., Vorobyov, R. S., Schegoleva, A. A., Rysenkova, K. D., Gaboriaud, J., Leonov, S. V., Denisov, E. V., Gautreau, A. M., and Alexandrova, A. Y. (2022) Inactivation of PTEN and ZFHX3 in mammary epithelial cells alters patterns of collective cell migration, Int. J. Mol. Sci., 24, 313, https://doi.org/10.3390/ijms24010313.

57. Zhitnyak, I. Y., Rubtsova, S. N., Litovka, N. I., and Gloushankova, N. A. (2020) Early events in actin cytoskeleton dynamics and E-cadherin-mediated cell-cell adhesion during epithelial-mesenchymal transition, Cells, 9, 578, https://doi.org/10.3390/cells9030578.

58. Thielicke, W., and Sonntag, R. (2021) Particle image velocimetry for MATLAB: accuracy and enhanced algorithms in PIVlab, J. Open Res. Softw., 9, 12, https://doi.org/10.5334/jors.334.

59. Thielicke, W., and Stamhuis, E. J. (2014) PIVlab – towards user-friendly, affordable and accurate digital particle image velocimetry in MATLAB, J. Open Res. Softw., 2, e30, https://doi.org/10.5334/jors.bl.

60. Jolly, M. K., Boareto, M., Huang, B., Jia, D., Lu, M., Ben-Jacob, E., Onuchic, J. N., and Levine, H. (2015) Implications of the hybrid epithelial/mesenchymal phenotype in metastasis, Front. Oncol., 5, 155, https://doi.org/10.3389/fonc.2015.00155.

61. Redfern, A. D., Spalding, L. J., and Thompson, E. W. (2018) The Kraken Wakes: induced EMT as a driver of tumour aggression and poor outcome, Clin. Exp. Metastasis, 35, 285-308, https://doi.org/10.1007/s10585-018-9906-x.

62. Khalil, A. A., Ilina, O., Gritsenko, P. G., Bult, P., Span, P. N., and Friedl, P. (2017) Collective invasion in ductal and lobular breast cancer associates with distant metastasis, Clin. Exp. Metastasis, 34, 421-429, https://doi.org/10.1007/s10585-017-9858-6.

63. Padmanaban, V., Krol, I., Suhail, Y., Szczerba, B. M., Aceto, N., Bader, J. S., and Ewald, A. J. (2019) E-cadherin is required for metastasis in multiple models of breast cancer, Nature, 573, 439-444, https://doi.org/10.1038/s41586-019-1526-3.

64. Pastushenko, I., Brisebarre, A., Sifrim, A., Fioramonti, M., Revenco, T., Boumahdi, S., Van Keymeulen, A., Brown, D., Moers, V., Lemaire, S., De Clercq, S., Minguijon, E., Balsat, C., Sokolow, Y., Dubois, C., De Cock, F., Scozzaro, S., Sopena, F., Lanas, A., D’Haene, N., et al. (2018) Identification of the tumour transition states occurring during EMT, Nature, 556, 463-468, https://doi.org/10.1038/s41586-018-0040-3.

65. Rubtsova, S. N., Zhitnyak, I. Y., and Gloushankova, N. A. (2022) Dual role of E-cadherin in cancer cells, Tissue Barriers, 10, 2005420, https://doi.org/10.1080/21688370.2021.2005420.

66. Berx, G., and Van Roy, F. (2001) The E-cadherin/catenin complex: an important gatekeeper in breast cancer tumorigenesis and malignant progression, Breast Cancer Res., 3, 289-293, https://doi.org/10.1186/bcr309.

67. Tungsukruthai, S., Petpiroon, N., and Chanvorachote, P. (2018) Molecular mechanisms of breast cancer metastasis and potential anti-metastatic compounds, Anticancer Res., 38, 2607-2618, https://doi.org/10.21873/anticanres.12502.

68. Ilina, O., Gritsenko, P. G., Syga, S., Lippoldt, J., La Porta, C. A. M., Chepizhko, O., Grosser, S., Vullings, M., Bakker, G. J., Starruss, J., Bult, P., Zapperi, S., Kas, J. A., Deutsch, A., and Friedl, P. (2020) Cell-cell adhesion and 3D matrix confinement determine jamming transitions in breast cancer invasion, Nat. Cell Biol., 22, 1103-1115, https://doi.org/10.1038/s41556-020-0552-6.

69. Ribeiro, A. S., and Paredes, J. (2014) P-Cadherin linking breast cancer stem cells and invasion: a promising marker to identify an “intermediate/metastable” EMT state, Front. Oncol., 4, 371, https://doi.org/10.3389/fonc.2014.00371.

70. Xu, Q., Niu, X., Wang, W., Yang, W., Du, Y., Gu, J., and Song, L. (2017) Specific N-glycan alterations are coupled in EMT induced by different density cultivation of MCF 10A epithelial cells, Glycoconj. J., 34, 219-227, https://doi.org/10.1007/s10719-016-9754-3.

71. Toker, A., Meyer, M., Reddy, K. K., Falck, J. R., Aneja, R., Aneja, S., Parra, A., Burns, D. J., Ballas, L. M., and Cantley, L. C. (1994) Activation of protein kinase C family members by the novel polyphosphoinositides PtdIns-3,4-P2 and PtdIns-3,4,5-P3, J. Biol. Chem., 269, 32358-32367, https://doi.org/10.1016/S0021-9258(18)31643-0.

72. Schonwasser, D. C., Marais, R. M., Marshall, C. J., and Parker, P. J. (1998) Activation of the mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase pathway by conventional, novel, and atypical protein kinase C isotypes, Mol. Cell Biol., 18, 790-798, https://doi.org/10.1128/MCB.18.2.790.

73. Suman, S., Kurisetty, V., Das, T. P., Vadodkar, A., Ramos, G., Lakshmanaswamy, R., and Damodaran, C. (2014) Activation of AKT signaling promotes epithelial-mesenchymal transition and tumor growth in colorectal cancer cells, Mol. Carcinog., 53, E151-E160, https://doi.org/10.1002/mc.22076.

74. Grille, S. J., Bellacosa, A., Upson, J., Klein-Szanto, A. J., van Roy, F., Lee-Kwon, W., Donowitz, M., Tsichlis, P. N., and Larue, L. (2003) The protein kinase Akt induces epithelial mesenchymal transition and promotes enhanced motility and invasiveness of squamous cell carcinoma lines, Cancer Res., 63, 2172-2178.

75. Zhu, Q. S., Rosenblatt, K., Huang, K. L., Lahat, G., Brobey, R., Bolshakov, S., Nguyen, T., Ding, Z., Belousov, R., Bill, K., Luo, X., Lazar, A., Dicker, A., Mills, G. B., Hung, M. C., and Lev, D. (2011) Vimentin is a novel AKT1 target mediating motility and invasion, Oncogene, 30, 457-470, https://doi.org/10.1038/onc.2010.421.

76. Li, C. W., Xia, W., Lim, S. O., Hsu, J. L., Huo, L., Wu, Y., Li, L. Y., Lai, C. C., Chang, S. S., Hsu, Y. H., Sun, H. L., Kim, J., Yamaguchi, H., Lee, D. F., Wang, H., Wang, Y., Chou, C. K., Hsu, J. M., Lai, Y. J., LaBaff, A. M., et al. (2016) AKT1 inhibits epithelial-to-mesenchymal transition in breast cancer through phosphorylation-dependent Twist1 degradation, Cancer Res., 76, 1451-1462, https://doi.org/10.1158/0008-5472.CAN-15-1941.

77. Walker, J. L., Bleaken, B. M., Romisher, A. R., Alnwibit, A. A., and Menko, A. S. (2018) In wound repair vimentin mediates the transition of mesenchymal leader cells to a myofibroblast phenotype, Mol. Biol. Cell, 29, 1555-1570, https://doi.org/10.1091/mbc.E17-06-0364.

78. Matsubayashi, Y., Ebisuya, M., Honjoh, S., and Nishida, E. (2004) ERK activation propagates in epithelial cell sheets and regulates their migration during wound healing, Curr. Biol., 14, 731-735, https://doi.org/10.1016/j.cub.2004.03.060.

79. Hino, N., Rossetti, L., Marin-Llaurado, A., Aoki, K., Trepat, X., Matsuda, M., and Hirashima, T. (2020) ERK-mediated mechanochemical waves direct collective cell polarization, Dev. Cell, 53, 646-660.e8, https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.05.011.