БИОХИМИЯ, 2022, том 87, вып. 7, с. 877–887

УДК 577.15.08

Неинвазивная диагностика рака почки с помощью ультрачувствительной иммунодетекции раково-сетчаточных антигенов

© 2022 Ю.М. Шляпников 1*yuri.shlyapnikov@gmail.com, Е.А. Малахова 1, Н.В. Потолдыкова 2, Я.А. Светочева 2, А.З. Винаров 2avinarov@mail.ru, Д.В. Зинченко 3zdv@bibch.ru, Е.Ю. Зерний 4zerni@belozersky.msu.ru, А.А. Замятнин мл. 4,5,6,7zamyat@belozersky.msu.ru, Е.А. Шляпникова 1

ФГБУН Институт теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии наук, 142290 Пущино, Московская обл., Россия

Институт урологии и репродуктивного здоровья человека, Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет), 119991 Москва, Россия

ФГБУН Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук, 117437 Москва, Россия

НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, 119992 Москва, Россия

Институт молекулярной медицины, Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет), 119991 Москва, Россия

Поступила в редакцию 28.04.2022
После доработки 06.06.2022
Принята к публикации 15.06.2022

DOI: 10.31857/S0320972522070041

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: раково-сетчаточные антигены, почечно-клеточный рак, иммуноанализ, магнитные частицы.

Аннотация

Почечно-клеточный рак является наиболее распространенным урологическим злокачественным новообразованием с высокой летальностью и низким уровнем выявляемости. Одним из подходов для улучшения диагностики может быть поиск новых неинвазивных биомаркеров, представленных в жидкой биопсии, и более чувствительных методов их детекции. Известно, что раково-сетчаточные антигены аберрантно экспрессируются в злокачественных опухолях и присутствуют в жидкой биопсии в крайне низких концентрациях. С помощью разработанного нами мультиплексного иммуноанализа с пределом детектирования 0,1 пг/мл мы исследовали мочу и сыворотку 89 больных почечно-клеточным раком и 50 неонкологических пациентов на присутствие раково-сетчаточных антигенов: аррестина, рековерина, родопсинкиназы и трансдуцина. Для оценки различий между почечно-клеточным раком и контролем использовали критерий χ2. Результаты показали высокую диагностическую эффективность комбинации аррестина и рековерина: при пороге 0,1 пг/мл чувствительность составила 96%, специфичность – 92%, AUC = 0,96 (95%‑ный доверительный интервал 0,93–0,99). Через 7 дней после нефрэктомии концентрации антигенов вернулись к уровням, характерным для контрольной группы. Таким образом, комбинация аррестина с рековерином может служить диагностическим неинвазивным мочевым биомаркером почечно-клеточного рака.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции.

Финансирование

Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант № 19-75-10025).

Вклад авторов

Ю.М. Шляпников, А.З. Винаров, А.А. Замятнин – концепция и руководство работой; Ю.М. Шляпников, Е.А. Малахова, Е.А. Шляпникова – проведение экспериментов; Н.В. Потолдыкова и Я.А. Светочева – сбор и обработка образцов; Д.В. Зинченко и Е.Ю. Зерний – получение антител и антигенов; Ю.М. Шляпников, А.З. Винаров, А.А. Замятнин – обсуждение результатов исследования; Е.А. Шляпникова и Ю.М. Шляпников – написание текста; Ю.М. Шляпников, А.А. Замятнин – редактирование финального текста статьи.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Соблюдение этических норм

Все применимые международные, национальные и/или институциональные принципы с участием людей были соблюдены.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы

Список литературы

1. Halabi, S., Yang, Q., Carmack, A., Zhang, S., Foo, W. C., et al. (2021) Tissue based biomarkers in non-clear cell RCC: correlative analysis from the ASPEN clinical trial, Kidney Cancer J., 19, 64-72, doi: 10.52733/kcj19n3-a1.

2. Li, F., Aljahdali, I. A. M., Zhang, R., Nastiuk, K. L., Krolewski, J. J., et al. (2021) Kidney cancer biomarkers and targets for therapeutics: survivin (BIRC5), XIAP, MCL-1, HIF1alpha, HIF2alpha, NRF2, MDM2, MDM4, p53, KRAS and AKT in renal cell carcinoma, J. Exp. Clin. Cancer Res., 40, 254, doi: 10.1186/s13046-021-02026-1.

3. Kobayashi, G., Sentani, K., Babasaki, T., Sekino, Y., Shigematsu, Y., et al. (2020) Claspin overexpression is associated with high-grade histology and poor prognosis in renal cell carcinoma, Cancer Sci., 111, 1020-1027, doi: 10.1111/cas.14299.

4. Signoretti, S., Flaifel, A., Chen, Y., and Reuter, V. E. (2018) Renal cell carcinoma in the era of precision medicine: from molecular pathology to tissue-based biomarker, J. Clin. Oncol., 36, 3553-3559, doi: 10.1200/JCO.2018.79.2259.

5. Kim, S., Park, W., Park, E., Park, B., Joo, J., et al. (2017) The prognostic value of BAP1, PBRM1, pS6, PTEN, TGase2, PD-L1, CA9, PSMA, and Ki-67 tissue markers in localized renal cell carcinoma: A retrospective study of tissue microarrays using immunohistochemistry, PLOS One, 12, e0179610, doi: 10.1371/journal.pone.0179610.

6. Graham, J., Heng, D. Y. C., Brugarolas, J., and Vaishampayan, U. (2018) Personalized management of advanced kidney cancer, Am. Soc. Clin. Oncol., 38, 330-341, doi: 10.1200/EDBK_201215.

7. Gulati, S., and Vogelzang, N. J. (2021) Biomarkers in renal cell carcinoma: Are we there yet? Asian J. Urol., 8, 362-375, doi: 10.1016/j.ajur.2021.05.013.

8. Lin, J., Yu, M., Xu, X., Wang, Y., Xing, H., et al. (2020) Identification of biomarkers related to CD8+ T cell infiltration with gene co-expression network in clear cell renal cell carcinoma, Aging, 12, 3694-3712, doi: 10.18632/aging.102841.

9. Linehan, W. M., Schmidt, L. S., Crooks, D. R., Wei, D., Srinivasan, R., et al. (2019) The metabolic basis of kidney cancer, Cancer Discov., 9, 1006-1021, doi: 10.1158/2159-8290.CD-18-1354.

10. Junker, K., and Zeuschner, P. (2019) Personalised medicine in renal cell tumours, Aktuelle Urol., 50, 513-523, doi: 10.1055/a-0895-9201.

11. Light, A., Ahmed, A., Dasgupta, P., and Elhage, O. (2020) The genetic landscapes of urological cancers and their clinical implications in the era of high-throughput genome analysis, BJU Int., 126, 26-54, doi: 10.1111/bju.15084.

12. Jonasch, E., Walker, C. L., and Rathmell, W. K. (2021) Clear cell renal cell carcinoma ontogeny and mechanisms of lethality, Nat. Rev. Nephrol., 17, 245-261, doi: 10.1038/s41581-020-00359-2.

13. Shan, L., Zhu, X. L., Zhang, Y., Gu, G. J., Cheng, X. (2021) Expression and clinical significance of NUF2 in kidney renal clear cell carcinoma, Transl. Androl. Urol., 10, 3628-3637, doi: 10.21037/tau-21-620.

14. Mytsyk, Y., Borys, Y., Tumanovska, L., Story, D., Kucher, A., et al. (2019) MicroRNA-15a tissue expression is a prognostic marker for survival in patients with clear cell renal cell carcinoma, Clin. Exp. Med., 19, 515-524, doi: 10.1007/s10238-019-00574-7.

15. Shi, L., Wang, M., Li, H., and You, P. (2021) MicroRNAs in body fluids: a more promising biomarker for clear cell renal cell carcinoma, Cancer Manag. Res., 13, 7663-7675, doi: 10.2147/CMAR.S330881.

16. Patel, S. H., Singla, N., and Pierorazio, P. M. (2021) Decision-making in active surveillance in kidney cancer: current trends and future urine and tissue markers, World J. Urol., 9, 2869-2874, doi: 10.1007/s00345-021-03786-3.

17. Voss, M. H., Chen, D., Marker, M., Hakimi, A. A., Lee, C.-H., et al. (2016) Circulating biomarkers and outcome from a randomised phase II trial of sunitinib vs everolimus for patients with metastatic renal cell carcinoma, Br. J. Cancer, 114, 642-649, doi: 10.1038/bjc.2016.21.

18. Yap, N. Y., Yap, F. N., Perumal, K., and Rajandram, R. (2019) Circulating adiponectin as a biomarker in renal cell carcinoma: A systematic review and meta-analysis, Biomarkers, 24, 1-24, doi: 10.1080/1354750X.2019.1634763.

19. Baldin, A. V., Grishina, A. N., Korolev, D. O., Kuznetsova, E. B., Golovastova, M. O., et al. (2019) Autoantibody against arrestin-1 as a potential biomarker of renal cell carcinoma, Biochimie, 157, 26-37, doi: 10.1016/j.biochi.2018.10.019.

20. Dakubo, G. D. (2019) Cancer Biomarkers in Body Fluids (Biomarkers in Proximal Fluids), doi: 10.1007/978-3-030-24725-6.

21. Flitcroft, J. G., Verheyen, J., Vemulkar, T., Welbourne, E. N., Rossi, S. H., et al. (2022) Early detection of kidney cancer using urinary proteins: a truly non-invasive strategy, BJU Int., 129, 290-303, doi: 10.1111/bju.15601.

22. Morrissey, J. J., London, A. N., Luo, J., and Kharasch, E. (2010) Urinary biomarkers for the early diagnosis of kidney cancer, Mayo Clin. Proc., 85, 413-421, doi: 10.4065/mcp.2009.0709.

23. Morrissey, J. J., Mellnick, V. M., Luo, J., Siegel, M. J., Figenshau, R. S., et al. (2015) Evaluation of urine aquaporin-1 and perilipin-2 concentrations as biomarkers to screen for renal cell carcinoma: a prospective cohort study, JAMA Oncol., 1, 204-212, doi: 10.1001/jamaoncol.2015.0213.

24. Hu, R., Gupta, R., Wang, Z., Wang, C., Sun, H., et al. (2019) Bioplasmonic paper-based assay for perilipin-2 non-invasively detects renal cancer, Kidney Int., 96, 1417-1421, doi: 10.1016/j.kint.2019.08.020.

25. Papale, M., Vocino, G., Lucarelli, G., Rutigliano, M., Gigante, M., et al. (2017) Urinary RKIP/p-RKIP is a potential diagnostic and prognostic marker of clear cell renal cell carcinoma, Oncotarget, 8, 40412-40424, doi: 10.18632/oncotarget.16341.

26. Di Meo, A., Batruch, I., Brown, M. D., Yang, C., Finelli, A., et al. (2020) Searching for prognostic biomarkers for small renal masses in the urinary proteome, Int. J. Cancer, 146, 2315-2325, doi: 10.1002/ijc.32650.

27. Shlyapnikov, Y. M., Malakhova, E. A., Vinarov, A. Z., Zamyatnin, A. A., and Shlyapnikova, E. A. (2021) Can new immunoassay techniques improve bladder cancer diagnostics with protein biomarkers? Front. Mol. Biosci., 7, 620687, doi: 10.3389/fmolb.2020.620687.

28. Golovastova, M. O., Tsoy, L. V., Bocharnikova, A. V., Korolev, D. O., Gancharova, O. S., et al. (2016) The cancer-retina antigen recoverin as a potential biomarker for renal tumours, Tumour Biol., 37, 9899-9907, doi: 10.1007/s13277-016-4885-5.

29. Chen, H., Werner, S., Tao, S., Zornig, I., and Brenner, H. (2014) Blood autoantibodies against tumour-associated antigens as biomarkers in early detection of colorectal cancer, Cancer Lett., 346, 178-187, doi: 10.1016/j.canlet.2014.01.007.

30. Savchenko, M. S., Goncharskaia, M. A., Skorikova, E. E., Eichmuller, S. B., Kushlinsky, N. E., et al. (2012) Autoantibodies against the Ca2+-binding protein recoverin in blood sera of patients with various oncological diseases, Oncol. Lett., 3, 377-382, doi: 10.3892/ol.2011.464.

31. Bazhin, A., Dalke, C., Willner, N., Abschutz, O., Wildberger, H., et al. (2009) Cancer-retina antigens as potential paraneoplastic antigens in melanoma associated retinopathy, Int. J. Cancer, 124, 140149, doi: 10.1002/ijc.23909.

32. Potter, M. J., Adamus, G., Szabo, S. M., Lee, R., Mohaseb, K., et al. (2002) Autoantibodies to transducin in a patient with melanoma associated retinopathy, Am. J. Ophthalmol., 134, 128130, doi: 10.1016/s0002-9394(02)01431-9.

33. Morozov, V. N., Groves, S., Turell, M. J., and Bailey, C. J. (2007) Three minutes-long electrophoretically assisted zeptomolar microfluidic immunoassay with magnetic beads detection, J. Am. Chem. Soc., 129, 12628-12629, doi: 10.1021/ja075069m.

34. Shlyapnikov, Y. M., Shlyapnikova, E. A., Simonova, M. A., Shepelyakovskaya, A. O., Brovko, F. A., et al. (2012) Rapid simultaneous ultrasensitive immunodetection of five bacterial toxins, Anal. Chem., 84, 5596-5603, doi: 10.1021/ac300567f.

35. Morozov, V. N., Nikolaev, A. A., Shlyapnikov, Y. M., Mikheev, A. Y., Shlyapnikova, E. A., et al. (2018) Non-invasive approach to diagnosis of pulmonary tuberculosis using microdroplets collected from exhaled air, J. Breath Res., 12, 036010, doi: 10.1088/1752-7163/aab3f2.

36. Morozov, V. N., and Morozova, T. Ya. (2006) Active bead-linked immunoassay on protein microarrays, Anal. Chim. Acta, 564, 40-52, doi: 10.1016/j.aca.2005.09.068.

37. Hanley, J. A., and McNeil, B. J. (1982) The meaning and use of the area under a receiver operating characteristic (ROC) curve, Radiology, 143, 29-36, doi: 10.1148/radiology.143.1.7063747.

38. Matsuo, S., Ohguro, H., Ohguro, I., and Nakazawa, M. (2010) Clinicopathological roles of aberrantly expressed recoverin in malignant tumour cells, Ophthalmic Res., 43, 139-144, doi: 10.1159/000253486.

39. Ohguro, H., Odagiri, H., Miyagawa, Y., Ohguro, I., Sasak, M., et al. (2004) Clinicopathological features of gastric cancer cases and aberrantly expressed recoverin, Tohoku J. Exp. Med., 202, 213-219, doi: 10.1620/tjem.202.213.

40. Závada, J., Závadová, Z., Zat’ovičová, M., Hyršl, L., and Kawaciuk, I. (2003) Soluble form of carbonic anhydrase IX (CA IX) in the serum and urine of renal carcinoma patients, Br. J. Cancer, 89, 1067-1071, doi: 10.1038/sj.bjc.6601264.

41. Morozova, T. Ya., and Morozov, V. N. (2008) Force differentiation in recognition of cross-reactive antigens by magnetic beads, Anal. Biochem., 374, 263-271, doi: 10.1016/j.ab.2007.12.007.