Амфипатические CRAC-содержащие пептиды-фрагменты белка М1 вируса гриппа модулируют холестерин-зависимую активность макрофагов IC-21

Аннотация

Проникновение многих патогенов вирусной и бактериальной природы в клетку-хозяина зависит от холестерина и холестерин-содержащих доменов (рафтов) в мембране. Ранее мы показали, что матриксный белок M1 вируса гриппа содержит амфипатические α-спирали, экспонирующие так называемые холестерин-распознающие аминокислотные последовательности (сholesterol-recognizing amino acid consensus, CRAC). С целью выяснения возможной функциональной активности этих участков вирусного белка мы исследовали влияние трех синтетических CRAC-содержащих пептидов на фагоцитозный индекс культивируемых макрофагов IC-21. Были исследованы пептиды, соответствующие трем α-спиралям белка M1: LEVLMEWLKTR (α-спираль 3, а.о. 39–49; далее пептид 1); NNMDKAVKLYRKLK (α-спираль 6, а.о. 91–105; пептид 2) и GLKNDLLENLQAYQKR (α-спираль 13, а.о. 228–243; пептид 3). Проведенные эксперименты показали, что все пептиды влияют на взаимодействие клеток IC-21 с неопсонизированными 2-мкм частицами. Наибольшей активностью обладал пептид 2: в присутствии 35 мкМ этого пептида фагоцитозный индекс повышался на 60% от контрольного уровня; метил-β-циклодекстрин (mβCD) (10–11 мМ) подавлял этот эффект. Пептиды 1 и 3 оказывали слабое угнетающее действие (на 20 и 15% от контроля соответственно) в диапазоне концентраций 5–10 мкМ. Кривые концентрационной зависимости эффектов аппроксимировались суммой двух кривых Хилла, соответствующих стимулирующей и ингибирующей компонентам. Это может свидетельствовать о наличии по крайней мере двух участков связывания на поверхности клеток. Спектры кругового дихроизма (КД) растворов пептидов подтверждают структурную пластичность пептидов в растворе. В целом, наши данные позволяют предположить, что CRAC-содержащие пептиды из вирусного белка М1 активны в отношении холестерин-зависимых процессов у макрофагов IC-21.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: