БИОХИМИЯ, 2018, том 83, вып. 6, с. 903–914

УДК 577.2, 579.6

Конструирование искусственных ФНО-связывающих белков на основе 10-го домена фибронектина III типа с помощью бактериального дисплея*

© 2018 Л.Н. Шингарова 1**, Л.Е. Петровская 1, А.В. Злобинов 1,2, С.Ш. Гапизов 1,2, Е.А. Крюкова 1, К.Р. Бирих 1, Е.Ф. Болдырева 1, С.А. Якимов 1, Д.А. Долгих 1,2, М.П. Кирпичников 1,2

1 Институт биоорганической химии им. акад. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 Москва, Россия; электронная почта: lshing@ibch.ru

2 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, биологический факультет, 119234 Москва, Россия

Поступила в редакцию 22.12.2017
После доработки 21.02.2018

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: фактор некроза опухолей, ФНО-связывающие белки, 10-й домен фибронектина III типа, бактериальный дисплей, аутотранспортер Psychrobacter cryohalolentis K5T.

Аннотация

Конструирование аналогов антител на основе альтернативных каркасных белков представляет собой перспективную стратегию создания новых лекарственных и биотехнологических препаратов. Целью настоящей работы явилась оптимизация системы клеточного дисплея вариантов каркасного белка 10-го домена фибронектина человека III типа (10Fn3) на основе аутотранспортера AT877 Psychrobacter cryohalolentis K5T и получение новых искусственных белков, связывающих фактор некроза опухолей (ФНО). Нами сконструирована комбинаторная библиотека генов вариантов 10Fn3 и проведена ее селекция методом бактериального дисплея. В результате экспрессии генов отобранных вариантов 10Fn3 в Escherichia coli и скрининга ФНО-связывающей активности выявлены белки, обладающие наиболее высокой аффинностью, и изучены их свойства.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow) http://protein.bio.msu.ru/biokhimiya, в рубрике «Papers in Press», BM17-552, 09.04.2018.

** Адресат для корреспонденции.