БИОХИМИЯ, 2018, том 83, вып. 5, с. 712–723
УДК 577.214.6;575.113.2
Системы регулируемой экспрессии генов как инструмент исследования гетерохроматинового эффекта положения у Drosophila melanogaster*
Институт молекулярной генетики РАН, 123182 Москва, Россия; электронная почта: slavrov@img.ras.ru
Поступила в редакцию 06.12.2017
После доработки 25.12.2017
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гетерохроматин, Drosophila, эффект положения, Gal4, Gal80, MiMIC, Gene-Switch.
Аннотация
Гетерохроматиновый эффект положения представляет собой нарушение транскрипции генов из-за изменения структуры хроматина под влиянием гетерохроматинового окружения. Механизмы гетерохроматинового эффекта положения остаются во многом загадочными, несмотря на продолжительные исследования. С целью анализа молекулярных механизмов гетерохроматинового эффекта положения сконструирована генетическая система, представленная вызывающей эффект положения хромосомной перестройкой и репортерным геном под контролем регуляторного элемента UAS, связывающего транскрипционный активатор GAL4. Проведен сравнительный анализ двух систем регуляции экспрессии на основе термочувствительного репрессора GAL4, GAL80ts и сконструированного на основе GAL4 искусственного трансактиватора Gene-Switch. Установлено, что обе системы могут регулировать уровень экспрессии репортерного гена в широком диапазоне, при этом GAL80ts ингибирует экспрессию эффективнее, чем Gene-Switch. Применение системы регулируемой экспрессии на основе GAL4 + GAL80ts позволило определить пороговый уровень транскрипции, при превышении которого не происходит вызванная гетерохроматином репрессия репортерного гена.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow) http://protein.bio.msu.ru/biokhimiya, в рубрике «Papers in Press», BM17-534, 09.04.2018.
** Адресат для корреспонденции.