БИОХИМИЯ, 2018, том 83, вып. 5, с. 712–723

УДК 577.214.6;575.113.2

Системы регулируемой экспрессии генов как инструмент исследования гетерохроматинового эффекта положения у Drosophila melanogaster*

© 2018 А.С. Шацких, О.М. Оленкина, А.A. Солодовников, С.А. Лавров **

Институт молекулярной генетики РАН, 123182 Москва, Россия; электронная почта: slavrov@img.ras.ru

Поступила в редакцию 06.12.2017
После доработки 25.12.2017

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гетерохроматин, Drosophila, эффект положения, Gal4, Gal80, MiMIC, Gene-Switch.

Аннотация

Гетерохроматиновый эффект положения представляет собой нарушение транскрипции генов из-за изменения структуры хроматина под влиянием гетерохроматинового окружения. Механизмы гетерохроматинового эффекта положения остаются во многом загадочными, несмотря на продолжительные исследования. С целью анализа молекулярных механизмов гетерохроматинового эффекта положения сконструирована генетическая система, представленная вызывающей эффект положения хромосомной перестройкой и репортерным геном под контролем регуляторного элемента UAS, связывающего транскрипционный активатор GAL4. Проведен сравнительный анализ двух систем регуляции экспрессии на основе термочувствительного репрессора GAL4, GAL80ts и сконструированного на основе GAL4 искусственного трансактиватора Gene-Switch. Установлено, что обе системы могут регулировать уровень экспрессии репортерного гена в широком диапазоне, при этом GAL80ts ингибирует экспрессию эффективнее, чем Gene-Switch. Применение системы регулируемой экспрессии на основе GAL4 + GAL80ts позволило определить пороговый уровень транскрипции, при превышении которого не происходит вызванная гетерохроматином репрессия репортерного гена.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Первоначально английский вариант рукописи опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow) http://protein.bio.msu.ru/biokhimiya, в рубрике «Papers in Press», BM17-534, 09.04.2018.

** Адресат для корреспонденции.