Взаимодействие между RAD51 и белками MCM-комплекса необходимо для образования очагов RAD51 в клетках рака толстой кишки HCT116^*

Аннотация

Рак толстой кишки является одним из наиболее распространенных в мире онкологических заболеваний пищеварительной системы. В настоящей работе были изучены возможные взаимодействия между RAD51 и белками подержания мини-хромосом (minichromosome maintenance proteins, MCMs) в клетках HCT116, которые могут служить в качестве модельной системы образования очагов рака толстой кишки. Взаимодействия между RAD51 и белками MCM регистрировали с помощью масс-спектрометрии. Клетки HCТ116 были трансфицированы векторами сайленсинга белков MCM. Экспрессию RAD51 и белков MCM определяли с помощью вестерн-блоттинга. Также было проанализировано образование очагов RAD51 и его содержание в хроматиновой фракции клеток HCT116. Полученные результаты показывают, что RAD51 непосредственно взаимодействует с MCM2, MCM3, MCM5 и MCM6 в опухолевых клетках HCT116. Супрессия MCM2 или MCM6 с помощью короткой шпилечной РНК (shRNA) снижала содержание RAD51 в хроматиновой фракции клеток HCT116. Кроме того, сайленсинг MCM2 или MCM6 вызывал снижение образования очагов RAD51 в клетках HCT116. Полученные нами результаты позволяют предположить, что взаимодействие между белками MCM и RAD51 необходимо для локализации RAD51 в хроматине и образовании его очагов в клетках HCT116 при восстановлении поврежденной ДНК, и эти данные могут быть использованы в качестве теоретической базы для анализа RAD51 в образцах опухоли больных раком толстой кишки.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: