БИОХИМИЯ, 2018, том 83, вып. 3, с. 379–390
УДК 577.151
Экспрессия растворимого и активного интерферона αА в периплазме Escherichia coli за счет слияния с термостабильной лихеназой методом инсерции домена*
1 Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН, 127276 Москва, Россия; электронная почта: irengold58@gmail.com
2 Российский государственный аграрный университет – Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева, 127550 Москва, Россия; электронная почта: alexjofar@gmail.com
3 Бакинский государственный университет, AZ 1148, Баку, Азербайджан; электронная почта: orkhan@bioset.org
Поступила в редакцию 30.08.2017
После доработки 02.11.2017
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: интерферон αА, термостабильная лихеназа, инсерция домена, экспрессия, растворимость, биологическая активность.
Аннотация
Сконструирована рекомбинантная ДНК, в которой последовательность гена интерферона αА интегрирована в петлевую область гена, кодирующего термостабильную лихеназу. Продемонстрировано, что подход инсерционного слияния с термостабильной лихеназой может быть выгодным в отношении увеличения растворимости, стабильности и продукции партнера слияния в растворимой форме в целом и в периплазме бактериальных клеток в частности. Так, инсерция интерферона αА в петлю (53 а.о.) термостабильной лихеназы из C. thermocellum привела к эффективной экспрессии растворимой формы рекомбинантного белка в периплазме E. coli без каких-либо компромиссов в биологической активности интерферона αА, при этом термостабильная лихеназа сохранила способность к функциональной укладке без драматической потери ее основных свойств – активности и термостабильности.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow) http://protein.bio. msu.ru/biokhimiya, в рубрике «Papers in Press», BM17-402, 25.12.2017.
** Адресат для корреспонденции.