Отрицательная кооперативность взаимодействия конкурентного ингибитора напроксена с простагландин-Н-синтазой-1 может быть описана как неконкурентное взаимодействие ингибитора с гетерогенным препаратом фермента^*

Аннотация

Кинетический механизм действия нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) на главную для них фармакологическую мишень, фермент простагландин-Н-синтазу (PGHS), до сих пор не установлен. Показано, что ингибирование PGHS-1 из везикулярных желез барана представителем НПВП напроксеном не демонстрирует конкурентный по отношению к арахидоновой кислоте характер и не описывается в рамках обычно используемых схем, но может быть описано с учетом наличия отрицательной кооперативности циклооксигеназных активных центров гомодимерного PGHS-1 при связывании напроксена (первая молекула напроксена образует более прочный комплекс (K₁ = 0,1 мкМ), чем вторая (K₂ = 9,2 мкМ)). Кажущийся неконкурентным наблюдаемый характер взаимодействия напроксена с ферментом объясняется медленной диссоциацией фермент-ингибиторных комплексов. Оказалось, что те же экспериментальные данные описываются и без привлечения представлений о взаимодействии между субъединицами фермента, но в предположении о наличии смеси двух форм фермента с константами ингибирования K_α = 0,05 мкМ и K_β = 18,3 мкМ. Теоретическое рассмотрение и численные расчеты показали, что такое явление кинетической конвергенции двух моделей имеет общий характер: при K₂ >> K₁ порождаемые кооперативной моделью кинетические закономерности (как в состоянии равновесия, так и для кинетики ингибирования) описываются схемой, предусматривающей наличие двух форм фермента с константами ингибирования K_α = K₁/2, K_β = 2 · K₂. При K₂ << K₁ кооперативная модель проявляет себя как схема одновременного присоединения к ферменту двух молекул ингибитора с наблюдаемой константой ингибирования K (K = K₁ · K₂). Сведение отрицательной кооперативности к простой неоднородности препарата фермента по сродству к ингибитору может служить удобным и простым способом для практического описания таких явлений в энзимологии, биотехнологии, фармакологии и других областях.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: