БИОХИМИЯ, 2018, том 83, вып. 1, с. 117–126
УДК 577.152.6
Характеристика и мутационный анализ двух УДФ-галактозо-4-эпимераз из Streptococcus pneumoniaе TIGR4
1 School of Life Sciences and State Key Laboratory of Microbial Technology, Shandong University Jinan, 250100 Shandong, China; E-mail: chenmin@sdu.edu.cn
2 Institute of Agro-Food Science and Technology, Shandong Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Agro-Products Processing Technology of Shandong Province/Key Laboratory of Novel Food Resources Processing, Ministry of Agriculture, 250100 Jinan, China; E-mail: chenleilei8210@163.com
Поступила в редакцию 05.07.2017
После доработки 30.09.2017
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: УДФ-галактозо 4-эпимераза (UDP-galactose 4-epimerase; GalE), Streptococcus pneumoniae TIGR4, мутация, субстратная специфичность.
Аннотация
Cовременные методы лечения заболеваний, вызванных пневмококковыми инфекциями, имеют множество ограничений и сталкиваются со многими проблемами. Поэтому необходимо исследовать новые капсулярные полисахаридные структуры, чтобы предотвратить заболевания, вызываемые различными серотипами Streptococcus pneumoniae. УДФ-галактозо-4-эпимераза (GalE) является ключевым ферментом синтеза полисахаридов и является важным фактором вирулентности у многих бактериальных патогенов. В работе были идентифицированы два гена (galESp1 и galESp2), ответственные за метаболизм галактозы в патогенных клетках S. pneumoniae TIGR4. Показано, что GalESp1 и GalESp2 катализируют эпимеризацию УДФ-глюкозы (UDP-Glc)/УДФ-галактозы (UDP-Gal), но только в случае GalESp2 была показана способность катализировать эпимеризацию УДФ-N-ацетилглюкозамина (UDP-GlcNAc)/УДФ-N-ацетилгалактозамина (UDP-GalNAc). Следует отметить, что GalESp2 обладал эпимеразной активностью в отношении UDP-Glc/UDP-Gal, превышающей в три раза активность GalESp1. Показано, что GalESp2 стабилен в широком диапазоне температур от 30 до 70 °C при pH 8,0. Аминокислотная замена K86G в GalESp2 приводила к потере эпимеразной активности в отношении UDP-Glc и UDP-Gal. Однако аминокислотная замена C300Y в GalESp2 вызывала только снижение этой активности в отношении UDP-GlcNAc и UDP-GalNAc. На основании полученных результатов можно предположить, что остаток лизина Lys86 играет ключевую роль в активности и субстратной специфичности GalESp2.
Текст статьи
Сноски
* Приложение к статье на английском языке опубликовано на сайте журнала «Biochemistry» (Moscow) и на сайте издательства Springer (Link.springer.com), том 83, вып. 1, 2018.
** Адресат для корреспонденции.