БИОХИМИЯ, 2017, том 82, вып. 6, с. 934–943
УДК 577.2
МикроРНК-630 сдерживает эпителиально-мезенхимальную трансформацию, контролируя экспрессию FoxM1 в клетках рака желудка человека
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: микроРНК-630, рак желудка (РЖ), эпителиально-мезенхимальная трансформация (ЭМТ), вильчатоглавый бокс белок М1 (FoxM1), миграция и инвазия.
Аннотация
Исследовали функциональную роль микроРНК (miR)-630 в эпителиально-мезенхимальноой трансформации (ЭМТ) клеток рака желудка (РЖ) и механизм действия этой miРНК. В клетки РЖ человека линии SGC 7901 трансфицировали искусственную miR-630 или ингибитор miR-630. Эффективность трансфекции контролировали с помощью количественной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РВ-ПЦР). Клеточную миграцию и инвазию изучали методом межкамерного перехода клеток. Трансляционную экспрессию Е-кадерина, виментина и вильчатоглавого бокс белка (FoxM1) определяли методом Вестерн-блоттинга. Кроме того, осуществляли оверэкспрессию и подавление экспрессии белка FoxM1, и при этом проверяли влияние аномальной экспрессии (оверэкспрессия или ингибирование экспрессии) miR-630 на ЭМТ и на миграцию и инвазию клеток РЖ, а также определяли уровни трансляции белковых факторов сигнального пути Ras/фосфоинозитид 3-киназа (PI3K)/AKT. В результате исследования установлено следующее: 1) ЭМТ и способность к миграции и инвазии у клеток РЖ достоверно снижались по сравнению с контролем в результате оверэкспрессии miРНК-630, но заметно возрастали при подавлении экспрессии miРНК-630 (все значения p < 0,05); 2) аномальная экспрессия белка FoxM1 приводила к обращению результатов этих воздействий miR-630 в клетках РЖ (все значения p < 0,05); 3) продукция белков GTP-Rac1, p-PI3K и p-AKT снижалась при оверэкспрессии miR-630, но возрастала при оверэкспрессии FoxM1; 4) значительного снижения уровней трансляции белков GTP-Rac1, p-PI3K и p-AKT, вызванного оверэкспрессией miR-630, не наблюдалось, если одновременно с miR-630 происходила оверэкспрессия FoxM1. Полученные данные свидетельствуют о том, что miR-630 может выступать в качестве сдерживающего противоопухолевого агента в клетках РЖ. Эта miРНК тормозит ЭМТ, контролируя белок FoxM1 в клетках РЖ, по-видимому, путем инактивации сигнального пути Ras/PI3K/AKT.