БИОХИМИЯ, 2017, том 82, вып. 5, с. 817–831
УДК 577.112
Два варианта рекомбинантного костного морфогенетического белка 2 (rhBMP-2) человека с дополнительными белковыми доменами: синтез в гетерологичной системе экспрессии Escherichia coli
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: рекомбинантный костный морфогенетический белок 2, гетерологичная экспрессия, Escherichia coli.
Аннотация
Получены два варианта рекомбинантного костного морфогенетического белка 2 (rhBMP-2), несущие на N-конце дополнительные белковые домены: s-tag (15-звенный олигопептид из рибонуклеазы А поджелудочной железы быка) и фрагмент транскрипционного фактора дрожжей GCN4, соответствующий димеризационному домену GCN4 «лейциновая молния» (GCN4 leucine zipper, lz). Разработана схема выделения и очистки двух вариантов рекомбинантных белков: s-tag-BMP-2 и lz-BMP-2, исключающая стадии длительного рефолдинга. Получены белковые препараты, содержащие димерные формы белков, обладающие повышенной растворимостью по сравнению с rhBMP-2, не имеющим дополнительных белковых доменов. Полученные белковые препараты проявляют биологическую активность как in vitro в экспериментах по индукции активности щелочной фосфатазы клетками линии C2C12, так и in vivo (s-tag-BMP-2) на лабораторных животных.