Роль затравок в образовании амилоидных фибрилл лизоцима в присутствии эпигалокатехина и полиэтиленгликоля

Аннотация

Предварительно сформированные амилоидные фибриллы могут служить в качестве затравок для ускорения фибриллогенеза из белков. В настоящей работе исследовали влияние предсформированных затравок на образование амилоидных фибрилл в присутствии двух разных ингибиторов: эпигаллокатехина (ЭГК) и полиэтиленгликоля 2000 (ПЭГ). Результаты показывают, что эффекты затравок на ускорение фибриллогенеза из лизоцима зависят от способа агрегации, определяемого ингибитором. ЭГК ингибирует фибриллообразование и вызывает дозо-зависимую модификацию полипептидной цепи путем добавления полихиновых групп. Полученные агрегаты характеризуются аморфной морфологией, свойственной для параллельных путей (off-pathway). Предсформированные фибриллярные затравки не способствовали фибриллогенезу из лизоцима в присутствии ЭГК. ПЭГ тоже ингибировал фибриллообразование из лизоцима, а агрегаты имели морфологию протофибрилл, характерную для основного пути (on-pathway). В то же время, добавление фибриллярных затравок в смесь лизоцима и ПЭГ в значительной мере стимулировало рост фибрилл. Тест на выживаемость клеток показал, что ЭГК и ПЭГ ингибируют цитотоксичность амилоидных фибрилл. В соответствии с данными теста с использованием тиофлафина Т, затравки не изменяют способность ЭГК-зависимых сопутствующих агрегатов повреждать клетки, но увеличивают цитотоксичность ПЭГ-зависимых фибрилл основного пути. Выдвинуто предположение о способе взаимодействия между лизоцимом и ингибитором, определяющим способ агрегации и, следовательно, влияние затравок на образование амилоидных фибрилл. ЭГК ковалентно модифицирует полипептидные цепи лизоцима путем добавления хинонов, направляя агрегацию через вспомогательный путь; в то время как ПЭГ действует нековалентно и рост фибрилл стимулируется через основной путь.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: