Гомолог глутатионзависимой формальдегиддегидрогеназы из клеток Bacillus subtilis штамма R5 является алкогольдегидрогеназой, предпочитающей пропанол

Аннотация

Изучение генома бактерии Bacillus subtilis позволило выявить наличие в нем открытой рамки считывания, аннотированной как глутатионзависимая формальдегид­дегидрогеназа/алкогольде­гидрогеназа. Эта рамка считывания состоит из 1137 п.н., соответствуя полипептиду из 378 а.о. В целях проверки, является ли кодируемый этой нуклеотидной последова­тельностью белок глутатион­зависимой формальдегид­дегидрогеназой или алкоголь­дегидрогеназой, мы ее клонировали и охарактеризовали полученный продукт. Анализ ферментативной активности показал, что данный белок обладает активностью металлозависимой алкогольдегидрогеназы, но не является глутатион­зависимой формальдегид­дегидрогеназой или альдегид­дисмутазой. Несмотря на то что этот белок имеет мезофильное происхождение, оптимальная температура для его ферментативной активности составляет 60°. Исследование термостабильности белка методом кругового дихроизма (КД) показало, что он устойчив к нагреванию вплоть до 60°. Присутствие ионов металла в реакционной среде не оказывало влияния на ферментативную активность белка, но было необходимым во время его продуцирования и фолдинга. Были отмечены определенные различия в ферментативной активности и КД-спектрах рекомбинантного фермента в присутствии и в отсутствие ионов металлов. Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что изучаемый фермент является полноценной алкогольдегидрогеназой и не обладает свойствами глутатион­зависимой формальдегид­дегидрогеназы.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: