БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 11, с. 1628–1642
УДК 571.27
Применение рекомбинантных MHC-тетрамеров для изоляции вирусспецифичных CD8+-клеток здоровых доноров: потенциальный подход к клеточной терапии посттрансплантационной цитомегаловирусной инфекции
1 Гематологический научный центр Минздрава России, 125167 Москва, Россия; электронная почта: grigory@efimov.info
2 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, 119991 Москва, Россия
3 Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117997 Москва, Россия
Поступила в редакцию 28.06.2016
После доработки 28.07.2016
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: цитомегаловирус, клеточная терапия, адоптивный перенос, трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, MHC-мультимеры.
Аннотация
Пациенты, проходящие процедуру трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, находятся в группе риска с повышенной вероятностью реактивации цитомегаловирусной инфекции, которая в отсутствие контроля со стороны Т-клеточного звена иммунитета вызывает острую воспалительную реакцию и приводит к поражению внутренних органов. Возможной альтернативой применению высокотоксичной и зачастую неэффективной противовирусной терапии является трансфузия вирусспецифичных Т-лимфоцитов донора. Одним из подходов клеточной терапии является трансфузия цитотоксических Т-лимфоцитов, специфичных к вирусным антигенам, непосредственно после их выделения из кровообращения донора без этапа экспансии in vitro. Для сепарации специфичных клеток от потенциально аллореактивных лимфоцитов возможно применение рекомбинантных мультимеров MHC, несущих синтетические вирусные пептиды. Немедленная трансфузия вирусспецифичных Т-лимфоцитов пациентам обладает целым рядом преимуществ перед методами, предполагающими экспансию клеток in vitro. Более 30% доноров стволовых клеток крови и 46% пациентов, которым была выполнена трансплантация в Гематологическом научном центре, являются носителями аллеля HLA-A*02. При этом 94% российских доноров имеют иммунный ответ к цитомегаловирусу (ЦМВ). С помощью полученных рекомбинантных мультимеров HLA-A*02, несущих иммунодоминантный пептид NLV ЦМВ, было показано, что большинство здоровых доноров имеет выраженный Т-клеточный иммунный ответ против данного антигена, тогда как пациенты в ранние сроки после трансплантации лишены специфичных Т-лимфоцитов. При этом донорские клетки имеют иммунофенотип клеток памяти и способны к антигензависимой активации и пролиферации. Лимфоциты донора могут быть обогащены до значительной чистоты с применением рекомбинантных MHС-мультимеров и не активируются при совместной культивации с антигенпрезентирующими клетками от HLA-несовместимых доноров без специфического антигена. Высокий уровень иммунного ответа на ЦМВ и широкая распространенность аллеля HLA-A*02 среди российских доноров позволяют применять мультимер HLA-A*02–NLV для выделения вирусспецифичных клеток. После трансфузии такие клетки должны обеспечивать защиту от ЦМВ без развития аллореактивного иммунного ответа.