БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 5, с. 710–720
УДК 577.322
Определение размера ядер сворачивания фибрилл, образованных рекомбинантным пептидом Aβ(1–40)
1 Институт белка РАН, 142290 Пущино Московской обл., ул. Институтская, 4; факс: +7(4967)31-8435, электронная почта: ogalzit@vega.protres.ru
2 Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии, 142279, Московская обл., Серпуховский р-н, пос. Оболенск, факс: +7(4967)36-0010, электронная почта: alan@vega.protres.ru
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: амилоидная фибрилла, протофибрилла, олигомер, зародыш, Аβ-пептид, болезнь Альцгеймера, электронная микроскопия.
Аннотация
Нами разработан метод высокоэффективной очистки рекомбинантного пептида Aβ(1–40). Методами флуоресцентной спектроскопии и электронной микроскопии была изучена концентрационная зависимость процесса амилоидообразования рекомбинантного пептида Aβ(1–40). Показано, что процессу амилоидообразования предшествует лаг-период, что свидетельствует о том, что данный процесс является нуклеационно-зависимым. Дальнейший экспоненциальный рост амилоидных фибрилл идет по сценарию ветвления. Из данных экспериментов по концентрационной зависимости были рассчитаны размеры ядер сворачивания фибрилл. Оказалось, что размер ядра первичной нуклеации составляет один «мономер», а размер ядра вторичной нуклеации – ноль. Это означает, что зародышем для новых агрегатов может выступать поверхность самих фибрилл. Методом электронной микроскопии показано, что фибриллы этих пептидов образуются за счет ассоциации округлых кольцевых структур.