БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 5, с. 701–709
УДК 577.15
Получение гомогенных полисахаридмонооксигеназ из грибных источников и изучение их синергизма с целлюлазами при действии на целлюлозу
1 Федеральный исследовательский центр «Фундаментальные основы биотехнологии» РАН, 119071 Москва
2 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет, 119991 Москва; факс: +7(495)939-0997, электронная почта: avgusakov@enzyme.chem.msu.ru
3 Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина РАН, 142292 Пущино Московской обл.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: биодеградация целлюлозы, аскомицеты, полисахаридмонооксигеназа, целлюлазный комплекс, синергизм.
Аннотация
Литические полисахаридмонооксигеназы (ПМО), открытые несколько лет назад, являются новыми ферментами, принадлежащими к классу оксидоредуктаз. Они участвуют в микробной биодеградации целлюлозы в природе совместно с целлюлазами гидролитического типа действия (класс гидролаз). С помощью различных видов хроматографии выделены и очищены до гомогенного состояния три ПМО из аскомицетов Thielavia terrestris, Trichoderma reesei и Myceliophthora thermophila. Первые два фермента представляют собой рекомбинантные белки, гетерологично экспрессированные грибом Penicillium verruculosum, тогда как третий фермент является нативной ПМО, секретируемой M. thermophila. При действии на микрокристаллическую целлюлозу ПМО проявляли синергизм с целлюлазным комплексом гриба P. verruculosum. При замене 10% целлюлаз (по концентрации белка) на ПМО выход сахаров через 24–48 ч ферментативной реакции в присутствии 6,25 мМ галлиевой кислоты или 2,5 мкМ целлобиозодегидрогеназы из M. thermophila, использованных в качестве необходимого для функционирования ПМО донора электронов, увеличивался на 17–31%.