БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 4, с. 555–562
УДК 577.112.7, 577.112.083
Q/N-обогащенный фрагмент Gln3, в отличие от полноразмерного белка, агрегирует при сверхпродукции в клетках Saccharomyces cerevisiae
1 Санкт-Петербургский государственный университет, кафедра генетики и биотехнологии, 199034 Санкт-Петербург; факс: +7(812)428-773, электронная почта: ant.nizhnikov@gmail.com
2 Санкт-Петербургский филиал Института общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, 199034 Санкт-Петербург
3 Всероссийский НИИ сельскохозяйственной микробиологии РАН, 196608 Санкт-Петербург, Пушкин
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: амилоид, прион, Gln3, Rnq1, Sup35, дрожжи, S. cerevisiae.
Аннотация
Аминокислотная последовательность транскрипционного фактора Gln3 дрожжей Saccharomyces cerevisiae содержит участок, обогащенный аспарагином и глутамином. В настоящей работе проведен анализ эффектов сверхпродукции полноразмерного Gln3 и его аспарагин-глутамин-обогащенного фрагмента, слитых с желтым флуоресцентным белком (Yellow Fluorescent Protein – YFP). Показано, что полноразмерный Gln3-YFP при сверхпродукции не агрегирует, подавляет вегетативный рост и проявляет ядерную локализацию. Аспарагин-глутамин-обогащенный фрагмент Gln3 (Gln3QN), слитый с YFP, в тех же условиях образует агрегаты, не колокализующиеся с ядром, а также не влияет на вегетативный рост. Несмотря на то, что детергент-устойчивые агрегаты Gln3QN образуются и в отсутствии дрожжевых прионов, его агрегация значительно усиливается в присутствии приона [PIN+], а в случае наличия в штамме двух прионов, [PSI+] и [PIN+], частота образования агрегатов Gln3QN достоверно ниже, чем в штамме, несущем только [PIN+]. Результаты экспериментов по колокализации показывают, что этот эффект опосредован взаимодействием между агрегатами Gln3QN и прионами [PSI+] и [PIN+].