БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 4, с. 527–537
УДК 616.15-005.6
Анализ экстраклеточных везикул с использованием магнитных наночастиц в крови больных с острым коронарным синдромом
1 Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова, лаборатория атеротромбоза, 109240 Москва; элетронная почта: asya.lebedev@mail.ru
2 Отдел межклеточных взаимодействий, Национальный институт детского здоровья и развития человека им. Юнис Кеннеди Шрайвер Национальных институтов здоровья, 20892, Мэриленд, США
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: экстраклеточные везикулы, тромбоциты, острый коронарный синдром, проточная цитометрия.
Аннотация
Экстраклеточные везикулы (ЭВ) выделяются из различных типов клеток и играют важную роль в межклеточных взаимодействиях. Изучено содержание индивидуальных ЭВ у пациентов с острыми формами ишемической болезни сердца. Проведен анализ фенотипического состава ЭВ (по маркерам CD31, CD41a и CD63) с использованием разработанной ранее методики индивидуального анализа ЭВ, конъюгированных с магнитными наночастицами (МНЧ). ЭВ выделяли из плазмы с помощью флуоресцентно меченых МНЧ, содержащих антитела к CD31, CD41a и CD63 антигенам, и выявляли их флуоресцирующими антителами к CD41а и CD63, CD31 и CD63, CD41a и CD31 соответственно. Анализировали ЭВ у 30 человек: 17 здоровых добровольцев и 13 больных с острым коронарным синдромом (ОКС). В дальнейшем, у 6 пациентов с ОКС был диагностирован острый инфаркт миокарда (ОИМ), у 7 – нестабильная стенокардия (НС). Преобладающая популяция ЭВ, выделенных из крови пациентов с ОКС и здоровых добровольцев, несет на своей поверхности антиген CD41a, указывающий на их тромбоцитарное происхождение. Общее количество ЭВ, выделенных с помощью любого из иммобилизующих антител и несущих на поверхности изучаемые маркеры, было выше у пациентов с ОКС по сравнению со здоровыми добровольцами. В подгруппе ОИМ отмечалось наиболее значимое преобладание количества ЭВ в крови по сравнению с контрольной группой. При этом увеличение числа ЭВ у пациентов с ОКС происходило, в основном, в субпопуляции ЭВ, положительных на маркер CD41a. При анализе индивидуальных ЭВ показано, что по сравнению с группой контроля у пациентов с ОКС, особенно при формировании инфаркта миокарда, в плазме преобладает фракция тромбоцитарных ЭВ, что может отражать активацию тромбоцитов у данных пациентов.