БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 3, с. 369–375
УДК 577.1
Идентификация участка полипептидной цепи α-субъединицы Na,K-АТРазы, взаимодействующего с мелиттинподобным белком c молекулярной массой 67 кДа
1 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, биологический факультет, 119991 Москва; факс: +7(495)939-3955, электронная почта: od_lopina@mail.ru
2 Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, 119991 Москва
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Na,K-АТРаза, мелиттинподобные белки, белок-белковые взаимодействия.
Аннотация
Ранее было установлено, что белок с молекулярной массой 67 кДа, выделенный из почек мыши с использованием поликлональных антител против мелиттина (пептид из яда пчелы), взаимодействует с Na,K-АТРазой, полученной из почек кролика. В настоящей работе методом иммунопреципитации выявлен 43-кДа протеолитический фрагмент α-субъединицы Na,K-ATPазы, взаимодействующий с 67-кДа мелиттинподобным белком из почек мыши. Протеолиз α-субъединицы был проведен с использованием трипсина в присутствии 0,5 мМ уабаина (Е2-конформация Na,K-АТРазы). Протеолитический фрагмент, идентифицированный методом масс-спектрометрии, представляет собой участок цитоплазматического домена полипептидной цепи α-cубъединицы Na,K-ATPазы, включающий аминокислотные остатки 591–775. В нем содержится консервативный мотив DPPRA, присутствующий во многих АТРазах Р-типа, с которым, как ранее было показано для Н,К-АТРазы из слизистой оболочки желудка, связывается мелиттин. Предполагается, что именно этот мотив АТРаз Р-типа способен взаимодействовать с белками, обладающими мелиттинподобными модулями.