БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 3, с. 361–368
УДК 577.151.62
Влияние ингибиторов тромбина на положительные обратные связи в каскаде коагуляции
1 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет, 119991 Москва; факс: +7(495)932-8846, электронная почта: NikUstinov@yandex.ru
2 ООО «Апто-фарм», 115446 Москва; факс: +7(495)725-4468
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: тромбин, тест генерации тромбина, аргатробан, бивалирудин.
Аннотация
Каскад коагуляции – серия последовательных реакций ограниченного протеолиза белковых факторов, в результате которой генерируется тромбин – ключевой регулятор каскада. Тромбин опосредует положительные и отрицательные обратные связи регуляции каскада, участвуя в активации ряда факторов. Некоторые ингибиторы тромбина, нарушая положительные обратные связи, ингибируют образование самого тромбина. В данной работе использованы два ингибитора тромбина: аргатробан – низкомолекулярный конкурентный обратимый ингибитор, связывающийся в активном центре, и бивалирудин – бивалентный олигопептид, который блокирует активный центр и центр связывания белковых субстратов (экзосайт I). В тесте генерации тромбина (ТГТ) с помощью флуорогенного субстрата измерено время появления и суммарное количество тромбина. Обнаружено, что аргатробан замедляет появление тромбина и снижает его количество. Бивалирудин также замедляет появление тромбина, но не снижает его количество, по-видимому, потому, что участок, который связан в активном центре, гидролизуется, и ингибитор перестает связываться с тромбином. Многие реакции каскада коагуляции проходят на поверхности фосфолипидных мицелл (ФЛМ). В случае аргатробана ФЛМ не влияют на результаты ТГТ, а в случае бивалирудина – снижают его ингибирующую активность. По-видимому, ФЛМ стабилизируют белковые комплексы, в которых экранируется экзосайт I тромбина и которые опосредуют положительные обратные связи каскада, например, комплексы тромбина с факторами V и VIII.