БИОХИМИЯ, 2016, том 81, вып. 2, с. 206–214
УДК 577.29
Активность тканевого фактора в микрочастицах, продуцируемых in vitro эндотелиальными клетками, моноцитами, гранулоцитами и тромбоцитами
Российский кардиологический научно-производственный комплекс Министерства здравоохранения Российской Федерации, 121552 Москва; факс: +7(495)414-6699, электронная почта: avmazurov@list.ru
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: мембранные микрочастицы, коагуляция, тканевой фактор, эндотелиальные клетки, моноциты, гранулоциты, тромбоциты.
Аннотация
Исследовали активность тканевого фактора (ТФ) в мембранных микрочастицах (МЧ), продуцируемых in vitro эндотелиальными клетками (ЭК), моноцитами, клетками моноцитарной линии THP-1, гранулоцитами и тромбоцитами. ЭК выделяли из пупочной вены человека, моноциты, гранулоциты и тромбоциты – из крови здоровых доноров. ЭК, моноциты и клетки THP-1 активировали бактериальным липополисахаридом, гранулоциты – липополисахаридом или форболмиристатацетатом, а тромбоциты – пептидом, активирующим рецептор тромбина (SFLLRN). МЧ осаждали из культуральной жидкости или супернатанта активированных клеток при 20000 g 30 мин. Коагуляционную активность МЧ регистрировали в модифицированном тесте рекальцификации по их эффектам на свертывание плазмы крови доноров, лишенной эндогенных МЧ (центрифугирование при 20000 g 90 мин). МЧ из всех клеток-продуцентов ускоряли свертывание плазмы. Антитела, блокирующие активность ТФ, удлиняли лаг-фазу свертывания в присутствии МЧ из ЭК, моноцитов и клеток THP-1 (в 2,7, 2,0 и 1,8 раза соответственно), но не влияли на свертывание в присутствии МЧ из гранулоцитов и тромбоцитов. Согласно с этими данными, активность ТФ, измеренная по его способности активировать фактор X, была зарегистрирована в МЧ из ЭК, моноцитов и клеток THP-1, но не в МЧ из гранулоцитов и тромбоцитов. Полученные результаты свидетельствуют о наличии активного ТФ в МЧ, продуцируемых in vitro ЭК, моноцитами и клетками THP-1, и его отсутствии в МЧ, продуцируемых гранулоцитами и тромбоцитами.