Сверхэкспрессия селенопротеина SelK в раковых клетках BGC-823 приводит к ингибированию их способности к адгезии и миграции

Аннотация

В представленной работе было исследовано влияние селенопротеина SelK человека на способность клеток линии BGC-823 рака желудка человека к адгезии в Матригеле и к миграции, изученной методом трансмембранного перехода клеток. Было установлено, что при сверхэкспрессии рекомбинантного белка SelK в клетках BGC-8 их способность к адгезии значительно снижалась по сравнению с нетрансфицированными клетками, не экспрессирующими этот белок (p < 0,01). При этом катастрофически падала также и способность этих клеток к миграции (p < 0,01). Было установлено, что при сверхэкспрессии усеченной с С-конца формы белка SelK (ct-SelK) клетки обладали почти такой же способностью к адгезии и к миграции, как и исходные нетрансфицированные BGC-8. В то же время исследования, проведенные на клетках линии HEK-293 почек эмбриона человека, показали, что при сверхэкспрессии белка SelK или его усеченной формы способности клеток к адгезии или миграции были примерно одинаковыми (p > 0,05). Помимо влияния на адгезию и миграцию сверхэкспрессия селенопротеина SelК сопровождалась снижением жизнеспособности культуры клеток BGC-8 (определено колориметрическим тестом с использованием МТТ) и индукцией апоптоза (определяли методами конфокальной микроскопии и проточной цитофлуорометрии). С использованием проточной цитофлуорометрии было также установлено, что в цитозоле этих клеток повышался уровень свободных ионов Ca²⁺. В то же время сверхэкспрессия SelK в клетках HEK-293 не приводила ни к существенному снижению их жизнеспособности, ни к индукции апоптоза, и лишь только уровень свободного кальция в цитозоле заметно возрастал. Все полученные нами результаты свидетельствуют о том, что SelK может ингибировать способность раковых клеток человека к адгезии на Матригеле и к миграции, снижать жизнеспособность трансфицированных клеток и индуцировать их апоптоз. Сопровождающий эту сверхэкспрессию выход Ca²⁺ из эндоплазматического ретикулума может являться одним из механизмов воздействия селенопротеина К на все эти процессы. Мы установили, что все вышеперечисленные эффекты на клетки оказывает только полноразмерный белок SelK, поскольку сверхэкспрессия усеченного с С-конца селенопротеина К не приводила к аналогичным результатам. Эмбриональные клетки человека не реагировали столь радикально, как раковые, на повышение уровня Ca²⁺ в цитозоле, а следовательно, они имели более широкий диапазон устойчивости к подобным колебаниям концентрации этих ионов.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: