БИОХИМИЯ, 2015, том 80, вып. 11, с. 1698–1706
УДК 58.088
Простой и быстрый метод выделения ДНК из гербарных образцов долгого срока хранения
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: выделение ДНК, гербарий, ПЦР, маркерные последовательности, 5S рРНК, rbcL.
Аннотация
В статье описывается удобный метод выделения ДНК из сухих фрагментов растений, хранившихся в гербарных коллекциях в течение 50–90 лет и имеющих высокое содержание вторичных метаболитов. Описанная процедура выделения ДНК занимает не более двух часов, состоит из трех последовательных стадий (лизис, осаждение нуклеиновых кислот изопропиловым спиртом, очистка на магнитных сорбентах) и не требует применения высоколетучих веществ (фенола, хлороформа, жидкого азота). Предлагаемый метод выделения ДНК позволяет получать из фрагментов листьев сухих гербарных образцов весом ~30 мг препараты высокого качества с концентрацией ДНК до 4 мкг. Показана возможность использования полученной предлагаемым методом ДНК для амплификации с последующим секвенированием маркерных последовательностей ядерного и хлоропластного геномов (фрагментов генов 5S рРНК и rbcL) при проведении филогенетических исследований.