БИОХИМИЯ, 2015, том 80, вып. 8, с. 1240–1249
УДК 578.2
Увеличение эффективности накопления целевого белка в растении путем его экспрессии под контролем двух субгеномных промоторов в составе фитовирусного вектора
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: вирус мозаики альтернантеры, вирусный вектор, суперпродукция целевого белка, субгеномный промотор.
Аннотация
В ходе данной работы были созданы несколько вирусных векторов, имеющих архитектуру деконструированного вируса и позволяющих экспрессировать гетерологичные белки в организме растений. В качестве основы для создания этих векторов был использован геном вируса мозаики альтетнантеры (ВМАльт) линии MU. Первый из серии полученных векторов (AltMV-single) имел структуру, характерную для вирусных векторов этого типа, то есть из генома ВМАльт был удален тройной блок генов, а целевой ген находился под контролем первого субгеномного промотора ВМАльт. Второй, созданный нами вектор (AltMV-double), отличался от AltMV-single наличием двух различных вирусных субгеномных промоторов, контролирующих экспрессию целевого гена. Нами было продемонстрировано, что AltMV-double обеспечивает существенно более высокий уровень аккумуляции целевого белка, чем AltMV-single. Кроме того, нами было выяснено, что для обеспечения наблюдаемого усиления экспрессии требуется наличие и функционирование обоих субгеномных промоторов в составе AltMV-double. На основании представленных данных нами был сделан вывод о том, что описанный в данной работе способ контроля экспрессии целевого гена с помощью двух субгеномных промоторов, использованный при создании вектора AltMV-double, является дополнительной возможностью увеличения эффективности экспрессии целевого гена, осуществляемой фитовирусным вектором.