БИОХИМИЯ, 2015, том 80, вып. 4, с. 556–567
УДК 577.152,577.113,579.252
Свойства ферментных препаратов и гомогенных ферментов эндоглюканазы EG2 Penicilium verruculosum и эндоглюканазы LAM Myceliophtora thermophila
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эндоглюканаза, β-глюкан, β-глюкан-эндодеполимеразы, ферментные препараты, Penicillium verruculosum, Myceliophtora thermophila.
Аннотация
Гены двух β-глюкан-эндодеполимераз EG2 (36,2 кДа) Penicillium verruculosum и LAM (30,8 кДа) Mycelyophtora thermophila были успешно клонированы в P. verruculosum, получены и охарактеризованы ферментные препараты (ФП), имеющие высокую активность по β-глюкану и ламинарину, а также высокую стабильность β-глюканазной активности. Выделены и охарактеризованы гомогенные ферменты EG2 (классифицирован как КФ 3.2.1.4) и LAM (классифицирован как КФ 3.2.1.6). Значение Кm EG2, определенной по β-глюкану, была в ~10 раз выше, чем у LAM, однако EG2 обладала большей процессивностью за счет более высокого значения kcat. Диапазоны оптимальных рН и температур EG2 и LAM перекрывались и составляли 4,3–4,9 и 61–67°, при этом EG2 оказалась более стабильной, чем LAM. Показано, что в результате гидролиза β-глюкана и ламинарина исследуемыми ферментами образуются олигосахариды со степенью полимеризации от 2 до 10. Установлено, что полученные рекомбинантные ФП при одинаковой дозировке с коммерческими ФП обеспечивали более быстрое и более существенное уменьшение приведенной вязкости цельнозернового экстракта ячменя, что делает их перспективными для использования их в качестве кормовой добавки для разрушения некрахмальных полисахаридов зерна.