БИОХИМИЯ, 2015, том 80, вып. 1, с. 150–156
УДК 577.354
Колокализация аденозинового рецептора A2B и аденозиндезаминазы в мембранах пристеночных клеток слизистой оболочки желудка
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: аденозиновый рецептор, аденозиндезаминаза, пуриновая сигнализация, клеточные мембраны, пристеночные клетки слизистой оболочки желудка.
Аннотация
Аденозиновый рецептор A2B (A2BR) опосредует биологические ответы на внеклеточный аденозин в самых разнообразных типах клеток. Аденозиндезаминаза (ADA) – фермент, разрушающий аденозин и способный связываться с аденозиновым рецептором на внешней поверхности клеток. Аденозин регулирует секрецию ионов хлора пристеночными клетками слизистой оболочки желудка. Тесные функциональные связи между A2BR и ADA были обнаружены в клетках иммунной системы, но пока неизвестно, происходят ли взаимодействия этих двух белков в клетках желудочно-кишечного тракта. Цель настоящей работы состояла в том, чтобы выяснить, коэкспрессируются ли A2BR и ADA на поверхности плазматических мембран секретирующих кислоту пристеночных клеток слизистой оболочки желудка. Клетки слизистой оболочки были изолированы после очистки элютриационным центрифугированием, а мембранная фракция была получена центрифугированием в градиенте сахарозы. Экспрессию мРНК A2BR анализировали методом ОТ-ПЦР. Поверхностную экспрессию A2BR и ADA изучали методами вестерн-блоттинга, проточной цитометрии и конфокальной микроскопии. Было установлено, что A2BR и ADA экспрессируются в мембранах пристеночных клеток желудка, и показана высокая степень их колокализации, что особенно заметно в местах контакта поверхностей пристеночных клеток. Данные, полученные методами конфокальной микроскопии и проточной цитометрии, свидетельствуют о тесной ассоциации между A2BR и ADA, что, возможно, непосредственно связано с секреторной функцией железистых клеток.