БИОХИМИЯ, 2015, том 80, вып. 1, с. 59–64
УДК 577.213
Негидролизуемый аналог ATP – 5'-Аденилил-имидодифосфат (AMP-PNP) – не ингибирует ATP-зависимое сканирование лидерной последовательности мРНК
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: инициация трансляции, рибосомный 48S инициаторный комплекс, AMP-PNP, тупринтинг.
Аннотация
Задача настоящей работы состояла в том, чтобы ответить на вопрос: возможно ли использование негидролизуемого аналога ATP – AMP-PNP – в качестве ингибитора ATP-зависимого сканирования лидерной последовательности эукариотической мРНК в исследованиях инициации трансляции. Проведено исследование образования рибосомных 48S инициаторных комплексов на стартовом кодоне кэпированной мРНК с лидерной последовательностью β-глобиновой мРНК кролика. Исследование проводилось в системе, состоящей из индивидуальных компонентов инициации трансляции. Получены зависимости эффективности образования 48S инициаторных комплексов от концентрации ATP и времени инкубации в отсутствие и в присутствии AMP-PNP. Показано, что во всех исследованных случаях AMP-PNP никак не влияет на эффективость образования 48S инициаторных комплексов. Сделан вывод, что нерасщепляемый аналог ATP – AMP-PNP – не является ингибитором инициации трансляции у эукариот.