БИОХИМИЯ, 2014, том 79, вып. 11, с. 1487–1492
УДК 577.152.313
Сверхэкспрессия гена PPX1 не влияет на полифосфаты Saccharomyces cerevisiae
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: полифосфаты, экзополифосфатаза, ген PPХ1, Saccharomyces cerevisiae, сверхэкспрессия.
Аннотация
Роль экзополифосфатазы РРХ1 в метаболизме полифосфатов у дрожжей изучена в штаммах Saccharomyces cerevisiae ΔPPX1 и ΔPPN1, трансформированных вектором экспрессии дрожжевого гена PPХ1. Экзополифосфатазная активность в штаммах-транcформантах увеличивалась в 90 и 40 раз по сравнению с исходными штаммами ΔPPX1 и ΔPPN1. По субстратной специфичности и потребности в катионах двухвалентных металлов очищенная рекомбинантная экзополифосфатаза РРХ1 была идентична РРХ1 диких штаммов S. cerevisiae. Фермент предпочтительно гидролизовал триполифосфат и низкомолекулярные полифосфаты и нуждался в ионах магния для проявления активности. Высокий уровень экспрессии PPX1 не вызывал существенного уменьшения содержания полифосфатов в клетках штаммов-трансформантов. Это позволяет предположить ограниченную роль РРХ1 в метаболизме полифосфатов у дрожжей.