БИОХИМИЯ, 2014, том 79, вып. 8, с. 999–1008
УДК 578.247
Дифференциальное связывание белков плазмы крови липосомами, несущими в бислое липофильные пролекарства метотрексата и мелфалана
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: наномедицина, противоопухолевые липосомы, мелфалан, метотрексат, липофильные пролекарства, белковая корона, система комплемента.
Аннотация
При контакте с плазмой крови наноразмерные частицы мгновенно покрываются так называемой белковой «короной», качественный и количественный состав которой определяет поведение наноносителя в кровотоке и, в конечном счете, фармакокинетику и биораспределение инкапсулированного лекарства. В свою очередь, состав белковой короны зависит от свойств поверхности наночастицы, а именно, от размера, распределения заряда и функциональных групп. Липосомы относятся к наиболее био- и гемосовместимым носителям, которые пригодны для внутривенного введения, необходимого при химиотерапии метастазирующих опухолей. Однако картина взаимодействия липосом различного состава с белками плазмы крови остается фрагментарной. Более того, потенциально все наноразмерные носители являются объектами действия врожденной иммунной системы, в первую очередь, системы комплемента (СК), что является причиной развития реакций гиперчувствительности различной степени тяжести. Недавно в тестах на гемосовместимость in vitro нами было показано, что липосомы из природных фосфолипидов – яичного фосфатидилхолина и фосфатидилинозита из S. cerevisiae, – нагруженные в бислое диглицеридными конъюгатами противоопухолевых препаратов мелфалана или метотрексата, не влияют на морфологию и численность основных форменных элементов крови человека. Однако в отличие от инертных препаратов с пролекарством мелфалана, метотрексат-содержащие липосомы вызывали нарушения в системе коагуляции крови и активировали СК. Целью настоящей работы явилось исследование взаимодействия липосом, несущих пролекарства мелфалана и метотрексата, с белками плазмы крови in vitro. Данные анализа общей адсорбционной способности липосом (количество связываемого белка) с помощью классической гель-хроматографии позволяют прогнозировать относительно быстрое выведение их из кровотока. С помощью иммуноблоттинга в профилях связывания белков выявлен ряд различий между липосомальными препаратами, который согласуется с полученными ранее данными о влиянии на СК. Обсуждается возможный механизм активации СК метотрексатсодержащими липосомами.