БИОХИМИЯ, 2014, том 79, вып. 2, с. 154–168
УДК 577.152.277
ДНК-метилтрансфераза 3а способна ингибировать вирус гепатита в посредством метилирования Х-промотера, специфичность которого обеспечивают цинковые пальцы
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: вирус гепатита B, X-промотер, ДНК-метилтрансфераза, цинковые пальцы, сайт-специфическое метилирование ДНК, регуляция генов, метилирование X-промотера приводит к снижению уровня экспрессии HBV.
Аннотация
Изучали вопрос: вызывает ли ДНК-метилтрансфераза 3а (Dnmt3a), специфичная к Х-промотеру (XP) вируса гепатита B, эпигенетическую супрессию последнего. C-конец ДНК-метилтрансферазы 3a (Dnmt3aC) был слит с пептидом, содержащим шесть цинковых пальцев и обладающим сродством к X-промотеру, в результате чего была получена химерная форма ДНК-метилтрансферазы, обозначаемая далее XPDnmt3aC. Специфичность связывания и метилирующей активности химерной XPDnmt3aC оценивали с помощью метода задержки в геле и метода специфичной к метилированию ПЦР, соответственно. Активность Х-промотера и экспрессия HBV были значительно снижены в клетках HepG2, трансфецированных плазмидой pXPDnmt3aC. Инъекция химерной XPDnmt3aC в трансгенные HBV мыши (TgHBV) также приводила к значительному ингибированию, что выражалось в понижении уровня поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) в сыворотке крови и уменьшению вирусной нагрузки. Таким образом, химерная ХPDnmt3aC специфически подавляет вирус гепатита B посредством сайт-специфичности метилирования ДНК, обеспечиваемой цинк-фингерными пептидами. Полученные результаты свидетельствуют о возможности эпигенетической регуляции заболеваний, ассоциированных с гепатитом В.