БИОХИМИЯ, 2014, том 79, вып. 1, с. 68–78

УДК 577.151.35 +577.151.33 + 577.151.042

Никотинамидаза из термофильной археи Acidilobus saccharovorans: структурно-функциональная характеристика

© 2014 Т.Н. Стеханова, Е.Ю. Безсуднова, А.В. Марданов, Е.М. Осипов, Н.В. Равин, К.Г. Скрябин, В.О. Попов

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: никотинамидаза, пиразинамидаза, архея, C-D-K каталитическая триада, металлсвязывающий мотив.

Аннотация

Никотинамидаза – фермент, участвующий в поддержании гомеостаза и рециркуляторном биосинтезе НАД+ у большинства прокариот, что делает его потенциальной мишенью лекарственной терапии. В геноме термофильной археи Acidilobus saccharovorans выявлен ген (ASAC_0847), кодирующий гипотетическую никотинамидазоподобную гидролазу. Продукт экспрессии данного гена в Escherichia coli, NA_AS0847, являющийся гомодимером с молекулярной массой 46,4 кДа, выделен и охарактеризован как Fe2+-содержащая никотинамидаза (kcat/Km = 427 мM–1 · с–1)/пиразинамидаза (kcat/Km = 331 мM–1 · с–1). Фермент характеризуется высокой термофильностью (Топт = 90°, Ea = 30,2 ± 1,0 кДж/моль) и термостабильностью (Т1/2 (60°) = 180 мин, Т1/2 (80°) = 35 мин), активен в широком диапазоне pH с оптимумом при pH 7,5. Отличительной особенностью NA_AS0847 является присутствие в активном центре ионов Fe2+ вместо Zn2+, а также ингибирование активности микромолярными концентрациями Zn2+. Проведенный анализ аминокислотных последовательностей гомологичных никотинамидаз архей позволил выявить новую консервативную последовательность металлсвязывающего мотива DXHXXXDXXEXXXWXXH.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha