БИОХИМИЯ, 2013, том 78, вып. 12, с. 1710–1714
УДК 577.213
Внутренняя инициация трансляции на полиуридиловой последовательности матричного полирибонуклеотида в бактериальной бесклеточной системе
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: полиуридиловая кислота, инициация трансляции, синтез полифенилаланина, Т4 РНК-лигаза, бесклеточная система трансляции.
Аннотация
Задача настоящей работы состояла в том, чтобы ответить на вопрос: нужен ли свободный 5′-конец модельному матричному полирибонуклеотиду – полиуридиловой кислоте – для его успешной трансляции в бактериальной (E. coli) бесклеточной системе? Проведено сравнение матричной активности препаратов исходной полиуридиловой кислоты со свободным 5′-концом и 5′-концом, блокированным путем ковалентного присоединения к нему цитидилового олигодезоксирибонуклеотида с флуоресцеином на его 5′-конце и уридиловым олигорибонуклеотидом на его 3′-конце, схематически описываемым как FAM(dC)10(rU)50. Показано, что синтез полифенилаланина на 5′-блокированной матрице происходит с той же эффективностью, что и на полиуридиловой кислоте со свободным 5′-концом. Сделан вывод, что бактериальные рибосомы способны успешно инициировать трансляцию на полиуридиловой последовательности не зависимо от 5′-конца матрицы, т.е. путем так называемой внутренней инициации, в отсутствие последовательности Шайна–Дальгарно и стартового AUG-кодона.