БИОХИМИЯ, 2013, том 78, вып. 11, с. 1627–1634
УДК 57.085.23
Органотипическая культура нейральной сетчатки как модель для исследования нейродегенерации ганглиозных клеток
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сетчатка, ганглиозные клетки, апоптоз, органотипическое роллерное культивирование.
Аннотация
Среди большого разнообразия методов культивирования сетчатки глаза позвоночных особого внимания заслуживают органотипические модели. Целью данной работы являлась детальная качественная и количественная характеристика модели, использующей роллерное органотипическое культивирование нейральной сетчатки в составе заднего сектора глаза крысы, при этом особое внимание отводилось рассмотрению морфофункциональных характеристик ганглиозных клеток сетчатки. Исследование включало морфологический анализ гистологических препаратов сетчатки, определение активности синтеза РНК и уровня апоптотической гибели ганглиозных клеток с помощью методов Браше и TUNEL соответственно. Показано, что в пределах первых двенадцати часов культивирования сетчатка демонстрирует морфофункциональные свойства, присущие этой ткани в норме. После первых суток культивирования существенное число клеток ганглиозного слоя подвергается пикнозу ядер и прекращает синтез РНК. К третьим–четвертым суткам культивирования практически все клетки ганглиозного слоя сетчатки находятся в состоянии апоптоза. В ходе культивирования нейральная сетчатка отделяется от подлежащих слоев заднего сектора глаза и претерпевает значительные изменения цитоархитектоники. Обсуждаются причины гибели клеток ганглиозного слоя сетчатки во время органотипического роллерного культивирования в составе заднего сектора глаза. Этот метод может быть предложен в качестве подходящей модели для поиска новых ретинопротекторов или для исследования гибели ганглиозных клеток при дегенеративных заболеваниях сетчатки, к примеру, при глаукоме.