БИОХИМИЯ, 2013, том 78, вып. 5, с. 488–499
УДК 577.217.36
Топология цепи мРНК в изолированных эукариотических двурядных полирибосомах*
1 Институт белка Российской академии наук
2 Institute of Genetics and of Molecular and Cellular Biology (IGBMC), Department of Integrated Structural Biology
3 INSERM U564
4 CNRS, UMR7104
5 Université de Strasbourg
Поступила в редакцию 17.12.2012
После доработки 24.01.2013
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эукариотические полирибосомы, мРНК, циркулярная трансляция, криоэлектронная томография.
Аннотация
В процессе биосинтеза белка транслирующие рибосомы эукариотических клеток формируют полирибосомы, представляющие собой сложный структурно-функциональный комплекс с характерной упорядоченной супер-организацией. По данным классической электронной микроскопии, преобладающими формами эукариотических полирибосом являются кольцевые и двурядные. Длинные (высоконагруженные) полирибосомы обычно представлены двурядными структурами, которые могут быть интерпретированы либо как топологически циркулярные («схлопнутые» кольца), либо как топологически линейные (зигзаги или винтовые спирали). В настоящей работе мы проанализировали способ укладки мРНК в эукариотических полирибосомах, изолированных из бесклеточной системы трансляции из зародышей пшеницы, совмещая два структурных подхода – визуализацию концов мРНК в полирибосомах с использованием маркировки 3′- и 5′-концов наночастицами коллоидного золота и инициирующими 40S субъединицами соответственно и криоэлектронную томографию. Анализ локализации маркеров в полирибосомах и взаимного расположения и ориентации рибосом в них показал, что «двурядные полирибосомы» одного препарата могут иметь как циркулярную, так и линейную организацию мРНК.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM12-235, 10.02.2013.
** Адресат для корреспонденции.
# Авторы внесли равный вклад в данную работу.
& Адрес в настоящее время: Научно-образовательный центр «Бионанофизика», Московский физико-технический институт, 141707 Долгопрудный, Институтский пер., 9
§ Адрес в настоящее время: Institute of Genetics and of Molecular and Cellular Biology (IGBMC), Illkirch, F-67404 France