БИОХИМИЯ, 2012, том 77, вып. 12, с. 1681–1692

УДК 577.218 + 577.151.042 + 577.112.083

Fe-зависимая супероксиддисмутаза из новой термоацидофильной кренархеи Aсidilobus saccharovorans: от гена до активного фермента

© 2012 Э.С. Слуцкая 1*, Е.Ю. Безсуднова 1, А.В. Марданов 2, И.В. Сафенкова 1, С.Ю. Клейменов 3, Н.А. Чеботарева 1, В.М. Гумеров 2, Н.В. Равин 2, К.Г. Скрябин 2,4, В.О. Попов 1,4

1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

2 Центр «Биоинженерия» РАН

3 Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН

4 Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт»

Поступила в редакцию 14.05.2012
После доработки 05.07.2012

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Acidilobus saccharovorans, металлофермент, Fe-зависимая супероксиддисмутаза, термостабильность.

Аннотация

В геноме термоацидофильной кренархеи Acidilobus saccharovorans обнаружен ген, кодирующий супероксиддисмутазу. Сконструированный рекомбинантный экспрессионный вектор трансформирован в клетки Escherichia coli. Новая рекомбинантная супероксиддисмутаза выделена и охарактеризована. Показано, что фермент относится к классу Fe-зависимых супероксиддисмутаз, способных связывать в активном центре разные двухвалентные металлы. Температура денатурации фермента по данным дифференциальной сканирующей калориметрии составляет 107,3°. Максимальная активность фермента со встроенным Fe(II), регистрируемая ксантиноксидазным методом, составляет 1700 ед/мг. Проведенные исследования термостабильности с помощью метода триптофановой флуоресценции препаратов супероксиддисмутазы с разным содержанием металлов позволили сделать вывод, что термостабильность и активность фермента прямо зависят от природы встроенного металла и степени насыщения центров связывания.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции.