БИОХИМИЯ, 2012, том 77, вып. 11, с. 1571–1583

УДК 577.112

Молекулярное клонирование, выделение и характеристика шаперона Skp из Yersinia pseudotuberculosis

© 2012 Е.В. Сидорин *, Н.М. Тищенко, В.А. Хоменко, М.П. Исаева, П.С. Дмитренок, Н.Ю. Ким, Г.Н. Лихацкая, Т.Ф. Соловьева

Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова ДВО РАН

Поступила в редакцию 29.05.2012
После доработки 25.06.2012

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: шаперон Skp, Yersinia pseudotuberculosis, иммуноглобулин G, химическое сшивание, МАЛДИ-масс-спектрометрия, компьютерное моделирование, белок-белковые взаимодействия.

Аннотация

Ген skp Yersinia pseudotuberculosis экспрессировали без сигнальной последовательности в клетках Escherichia coli BL21(DE3). Рекомбинантный белок Skp накапливался в растворимой форме в цитозоле индуцированных клеток штамма-продуцента. Он был выделен и охарактеризован: определены молекулярная масса, изоэлектрическая точка, N-концевая аминокислотная последовательность (20 аминокислотных остатков) и содержание элементов вторичной структуры. С использованием сшивающего реагента методом МАЛДИ-масс-спектрометрии было показано, что rSkp является гомотримером и взаимодействует с IgG человека. С помощью компьютерного моделирования построены модели пространственной структуры тримера Skp и его комплексов с Fc- и Fab-фрагментами IgG1 человека.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции.