БИОХИМИЯ, 2012, том 77, вып. 11, с. 1556–1566
УДК 577.152.3
Клонирование, выделение и характеристика галактоманнангидролизующих ферментов Myceliophthora thermophila
1 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет
2 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
3 Dyadic Nederland BV
Поступила в редакцию 25.04.2012
После доработки 18.05.2012
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Myceliophthora thermophila, β-маннозидаза, β-маннаназа, α-галактозидаза, ферментативный гидролиз.
Аннотация
Гены β-маннозидазы массой 97 кДa второй семьи гликозилгидролаз (bMann9), β-маннаназы массой 48 кДa пятой семьи гликозилгидролаз (bMan2) и α$галактозидазы массой 60 кДa 27-й семьи гликозилгидролаз (aGal1), кодирующие галактоманнангидролизующие гликозилгидролазы Myceliophthora thermophila C1, были успешно клонированы. Рекомбинантные ферменты были очищены до гомогенного состояния и охарактеризованы. bMann9 продемонстрировала только экзоманнозидазную активность (значения Km и kcat по п-нитрофенил-β-D-маннопиранозиду были равны 0,4 мМ и 15 с–1 соответственно, а оптимальные значения рН и температуры – 5,3 и 40° соответственно). bMan2 проявила активность по отношению к галактоманнанам (ГМ) различной структуры. Было установлено, что значения Km и kcat составляют 1,3 мг/мл и 67 с–1 по карубину, оптимальные значения рН и температуры – 5,2 и 69° соответственно. aGal1 была одновременно активна по п-нитрофенил-α-D-галактопиранозиду (ПНФГ) и ГМ различной структуры. Было установлено, что значения Km и kcat составляют 0,08 мМ и 35 с–1 по ПНФГ, а оптимальные значения рН и температуры – 5,0 и 60° соответственно.
Текст статьи
Сноски
* Адресат для корреспонденции.