БИОХИМИЯ, 2012, том 77, вып. 10, с. 1433–1442

УДК 577.3

Получение, биохимическая характеристика и структура рекомбинантной эндо-1,4-β-ксиланазы XylE

© 2012 Т.В. Федорова 1, А.М. Чулкин 1, Е.А. Вавилова 1, И.Г. Майсурадзе 1, А.А. Трофимов 1,2, И.Н. Зоров 1, В.П. Хотченков 1, К.М. Поляков 1,2, С.В. Беневоленский 1, О.В. Королева 1*, В.С. Ламзин 3

1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

2 Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

3 European Molecular Biology Laboratory (EMBL), c/o DESY

Поступила в редакцию 20.06.2012
После доработки 02.07.2012

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Penicillium canescens, ксиланаза, гомологичная экспрессия, XylE, 3D структура, биохимические и физико-химические свойства, субстратная специфичность.

Аннотация

Ген xylE эндо-1,4-β-ксиланазы десятого семейства гликозил-гидролаз мицелиального гриба Penicillium canescens экспрессирован под контролем сильного промотора гена bgaS, кодирующего β-галактозидазу P. canescens и получен штамм – продуцент эндоксиланазы XylE. Фермент выделен в гомогенном состоянии (специфическая активность 50 ед/мг) и исследованы его физико-химические и биохимические свойства. Максимальная ферментативная активность наблюдалась при рН 6,0 и 70°. Эндоксиланаза XylE является высокостабильным ферментом, период полуинактивации фермента τ1/2 при 60° равен 7 ч. Кинетические параметры, определенные по березовому ксилану, равнялись 0,52 мг/мл (Km) и 75 мкМоль/мин/мг (Vmax). Получены кристаллы эндоксиланазы XylE и решена трехмерная структура с разрешением 1,47 Å. Впервые определена кристаллическая структура эндо-1,4-β-ксиланазы 10 семейства, содержащая углеводы и уникальную циклическую структуру на С-конце.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи:

captcha

Сноски

* Адресат для корреспонденции.