Воздействие на профиль N-гликозилирования моноклональных анти-D антител как способ управления их иммунорегуляторными и цитотоксическими свойствами^*

Аннотация

Способность поликлональных анти-D антител блокировать у женщин иммунный ответ против D-положительных эритроцитов плода лежит в основе профилактики гемолитической болезни новорожденных. Иммуносупрессорный эффект анти-D антител опосредован взаимодействием их Fc фрагментов с низкоаффинными Fcγ рецепторами (FcγR) иммунных клеток. Создание эффективного моноклонального препарата, способного заменить в клинике поликлональный анти-резус-иммуноглобулин, остается нерешенной задачей. Целью настоящей работы было сравнение структурных и функциональных свойств поликлональных и моноклональных (МКА) анти-D антител человека, а также оценка возможности манипулирования эффекторными свойствами МКА. Характер N-гликозилирования антител и содержание дефукозилированных гликанов оказывают решающее действие на сродство к FcγRIIIА, который обеспечивает ускоренный клиренс D-положительных эритроцитов. Проведено исследование гликоформ и способности вызывать FcγRIIIА-опосредованный гемолиз у поликлональных анти-D антител и МКА, экспрессированных В-клеточными линиями человека, миеломными линиями грызунов и нелимфоидной линией клеток человека PerC6. Показано, что смена клеток продуцентов и использование модуляторов гликозилирования могут трансформировать неактивные МКА в высокоактивные. Однако продуценты на основе клеточных линий грызунов, а также нелимфоидных клеток человека искажают естественный профиль гликозилирования IgG человека, что может приводить к утрате иммуносупрессорных свойств антител. Показано, что каждое анти-D МКА, секретируемое клонированной В-клеточной линией человека, представляет собой смесь гликоформ, близкую по составу к IgG сыворотки человека. Из полученных данных следует, что постоянное соотношение гликоформ IgG сыворотки предопределено гликозилированием антител на уровне индивидуальной антитело-продуцирующей клетки. Обнаружено, что фракция анти-D антител из поликлонального препарата содержит больше дефукозилированных форм олигосахаридов по сравнению с общим IgG сыворотки человека. Таким образом, трансформированные линии В-клеток человека представляются единственным подходящим источником эффективных анти-D МКА, способных имитировать свойства поликлонального анти-резус-иммуноглобулина.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: