Двухстадийный метод получения церулоплазмина на основе его взаимодействия с неомицином

Аннотация

Описан двухстадийный хроматографический метод, позволяющий получить высокоочищенный церулоплазмин (CP) из плазмы крови человека и из сыворотки крови крыс и кроликов с высоким выходом, в основе которого лежит взаимодействие СР с неомицином. Определены константы ингибирования оксидазной активности CP человека в реакции с п-фенилендиамином для гентамицина, канамицина и неомицина. Установлено, что наименьшая величина K_i для неомицина (11 мкМ) совпадала с наибольшей удельной сорбцией CP на неомицин-агарозе (10 мг CP/мл сорбента). Применение ионообменной хроматографии на UNO-Sphere Q и аффинной хроматографии на неомицин-агарозе увеличивает степень очистки содержащихся в плазме 348 мг CP в 412 раз. При хранении в стерильных условиях при 37° препарат СР стабилен в течение двух месяцев. По аналогичному протоколу получены препараты высокоочищенного CP из сыворотки крови крыс и кроликов, что позволяет предположить применимость данного метода для выделения CP из плазмы и сыворотки крови других животных; выход CP по данным трех независимых опытов выделения был не менее 78%.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: