БИОХИМИЯ, 2012, том 77, вып. 4, с. 442–451
УДК 577.24
Влияние центрина-2 на взаимодействие факторов эксцизионной репарации нуклеотидов с поврежденной ДНК*
1 Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН
2 Integrative Imaging Unit, INSERM U759/Institut Curie-Recherche, Centre Universitaire Paris-Sud
Поступила в редакцию 01.11.2011
После доработки 13.12.2011
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эксцизионная репарация нуклеотидов, центрин-2, фотоаффинная модификация, комплексообразование белковых факторов репарации с ДНК.
Аннотация
Исследовано влияние центрина-2 (Cen2) на взаимодействие факторов эксцизионной репарации нуклеотидов – XPC-HR23b, RPA и XPA – с 48-мерными ДНК-дуплексами, содержащими производное dUMP (5-{3-[6-(карбоксиамидо-флуоресцеинил)амидокапромоил]аллил}-2′-дезоксиуридин-5′-монофосфат). Остаток флуоресцеина, присоединенный к основанию нуклеотида, имитирует объемное повреждение ДНК. Показано, что Cen2 стимулирует связывание и повышает выход белок-нуклеиновых аддуктов ДНК с XPC-HR23b – белком, узнающим объемные повреждения в структуре ДНК. Эффект стимуляции комплексообразования наиболее выражен в присутствии Mg2+ и имеет колоколообразную зависимость от концентрации Cen2. В присутствии Cen2 изменяется стехиометрия комплексов RPA-ДНК и уменьшается выход ковалентных сшивок RPA с ДНК. Обнаружено влияние Cen2 на совместное комплексообразование RPA и XPA с ДНК, выраженное в появлении дополнительных ДНК-белковых комплексов, возможно, включающих центрин-2. Получены данные о существовании прямых контактов Cen2 с ДНК. Результаты настоящих исследований в совокупности с литературными данными позволяют предположить, что Cen2 является регуляторным элементом системы ЭРН.
Текст статьи
Сноски
* Первоначально английский вариант рукописи был опубликован на сайте «Biochemistry» (Moscow), Papers in Press, BM11-294, 19.02.2012.
** Адресат для корреспонденции.