Биохимическая характеристика сборки железосерного кластера IscU в клетках Escherichia coli^*,**

Аннотация

Железосерный кластер является одним из наиболее распространенных простетических групп, но в настоящее время еще мало известно о механизмах биосинтеза железосерного кластера. В данной работе клонировали и очищали содержащие железосерный кластер белки, выделенные из клеток Escherichia coli, и собирали кластер in vitro. Показано, что сборка железосерного кластера происходит приблизительно в течение 20 мин. Хотя железо или сера связываются с IscU одинаково, увеличение количества железа или цистеина в два раза по сравнению с IscU облегчает сборку кластера, тогда как высокая концентрация IscS (IscS : IscU > 1 : 10) не способствует образованию кластера. Значение рН окружающей среды играет важную роль в сборке железосерного кластера: кластер собирался при рН 7,6–8,0, если рН меньше 7,4 – сборка кластера ингибировалась. При запасе каталитического количества IscS (1/50 of IscU) и избытке других субстратов, а также при увеличении концентрации IscU, железа или цистеина процесс сборки железосерного кластера превращался из реакции первого порядка или реакции смешанного порядка в реакцию нулевого порядка. До 64% apo-IscU превращалось в кластер [2Fe–2S], связанный с IscU при оптимальных лабораторных условиях.

Текст статьи

Пожалуйста, введите код, чтобы получить PDF файл с полным текстом статьи: