БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 11, с. 1517–1524
УДК 577.354.171.6
NMDA-рецепторы – возможные компоненты депозависимого входа Са2+ в Т-лимфоциты человека
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Т-лимфоциты человека, NMDA-рецепторы, Т-клеточный рецептор, депозависимый вход Са2+, сигнальные каскады.
Аннотация
Повышение содержания внутриклеточного кальция при связывании Т-клеточного рецептора с чужеродным антигеном запускает в Т-лимфоцитах транскрипционные программы, ведущие к секреции эффекторных цитокинов и координации иммунного ответа. Возрастание содержания Ca2+ в Т-лимфоцитах осуществляется за счет Ins(1,4,5)P3-зависимого высвобождения Ca2+ из внутриклеточных депо с последующим его поступлением из наружной среды. Кальциевые каналы, сопряженные с ионотропными рецепторами глутамата NMDA-подтипа, экспрессируются на поверхности Т-лимфоцитов человека и могут вовлекаться в механизмы депозависимого входа Ca2+ в этом типе клеток. С использованием флуоресцентного красителя Fluo-4AM и проточной цитометрии показано, что неконкурентный антагонист NMDA-рецепторов (+)-МК801 подавляет вход Ca2+ в лимфоциты, индуцированный тапсигаргином. При инкубации (+)-МК801 совместно с тапсигаргином не выявлено влияния антагониста на фазу мобилизации Ca2+ из внутриклеточных депо, но отмечено незначительное ингибирование входа Ca2+ в клетки из наружной среды. В совокупности полученные данные свидетельствуют о том, что канальный блокатор (+)-МК801 оказывает ингибирующее влияние на процессы входа Ca2+, и подтверждают наше предположение об участии NMDA-рецепторов в механизмах депозависимого входа Ca2+ в Т-лимфоциты человека. Для идентификации сигнальных каскадов, осуществляющих передачу сигналов от NMDA-рецепторов в активированных митогенами Т-лимфоцитах, клетки инкубировали с (+)-МК801 и детектировали содержание фосфорилированных форм ключевых протеинкиназ МАР-активируемых (рERK1/2, pSAPK/JNK, p-p38), Ca2+-зависимых (рСаМКII), PI3/Akt-зависимых (pGSK-3β) и PKC-активируемых (pPKCθ) сигнальных путей. Как следует из полученных нами данных, при действии (+)-МК801 снижение содержания ДАГ-зависимой рPKCθ и Ca2+-зависимой протеинкиназы рСаМКII было не столь выраженным по сравнению с таковым Ras-активируемой протеинкиназы рERK1/2 и Rac-активируемых белков р-р38 и рSAPK/JNK, что, вероятно, отражает преимущественную регуляцию NMDA-рецепторами Ras/Rac-зависимого сигналинга в Т-лимфоцитах.