БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 10, с. 1387–1397
УДК 577.152
Новые актинопорины актинии Heteractis crispa: клонирование и функциональная экспрессия
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: актиния, актинопорины, мультигенное семейство Hct-S, рекомбинантные актинопорины, гемолитическая активность, структурно-функциональный анализ.
Аннотация
С помощью методов белковой химии из тропической актинии Heteractis crispa (=Radianthus macrodactylus) выделен новый представитель семейства сфингомиелинингибируемых α-пороформирующих токсинов актиний, актинопорин Hct-S4 (молекулярная масса 19414 ± 10 Да). Определена аминокислотная последовательность N-концевого фрагмента Hct-S4 (20 а.о.). Клонированы и секвенированы гены, кодирующие 18 новых изоформ актинопоринов H. crispa. Данные гены образуют мультигенное семейство Hct-S, отличительной чертой которого является наличие в зрелой форме актинопорина N-концевого остатка серина. Установлено наличие высокой консервативности остатков, входящих в ароматический фосфорилхолиновый сайт связывания актинопоринов с мембраной, а также функционально-значимых замен в области N-концевого фрагмента (10–27 а.о.). Экспрессированы и охарактеризованы два рекомбинантных актинопорина, rHct-S5 и rHct-S6. Установлено, что их гемолитическая активность на порядок ниже активности известных нативных актинопоринов.