БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 9, с. 1264–1272
УДК 577.122
Селенопротеин dSelK в Drosophila стимулирует освобождение Ca2+ из эндоплазматического ретикулума путем увеличения экспрессии рецептора инозитол-1,4,5-трифосфата
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Drosophila melanogaster, селенопротеин, dSelK, dsРНКi, Ca2+, рецептор инозитол1,4,5-трифосфата.
Аннотация
Обогащенный глицином белок dSelK – один из трех селенопротеинов Drosophila melanogaster – гомологичен по своей структуре белку SelK человека и мыши. Это единственный селенопротеин в D. melanogaster, имеющий трансмембранное расположение и локализованный в эндоплазматическом ретикулуме и аппарате Гольджи. Экспрессия различных генов в клетках Drosophila Schneider 2 (S2) после введения в них dSelK-специфичной интерферирующей двунитевой РНК (dsРНКi) изучена с помощью генной матрицы GeneChip® Drosophila Genome 2.0 Array («Affymetrix») – высокоплотного олигонуклеотидного микрочипа, содержащего практически полный геном Drosophila. Установлено, что под влиянием dsРНКi происходила транскрипционная индукция или репрессия восьми генов, кодирующих белки, локализованные (либо имеющие отношение) в эндоплазматическом ретикулуме или аппарате Гольджи. Например, содержание мРНК рецептора инозитол-1,4,5-трифосфата (IP3R), являющегося интегральным белком мембран эндоплазматического ретикулума, регулирующим освобождения Ca2+из ретикулума в цитозоль, существенно снижалось под воздействием dsРНКi. Наоборот, транскрипционная экспрессия инозитол-1,4,5-трифосфаткиназы 1, являющейся растворимым белком цитозоля и функционирующей в качестве антагониста IP3R, в присутствии dsРНКi существенно увеличивалась. Результаты были подтверждены методом количественной ПЦР в режиме реального времени. Нокдаун dSelK путем введения в клетки S2 специфической dsРНКi приводил к значительному снижению концентрации внутриклеточного свободного Ca2+, тогда как избыточная экспрессия dSelK (гиперэкспрессия) сопровождалась повышением концентрации Ca2+ в цитозоле. Полученные данные свидетельствуют о том, что dSelK в D. melanogaster принимает участие в регуляции освобождения кальция из эндоплазматического ретикулума в цитозоль и может играть ключевую роль в передаче сигнала, опосредующего мобилизацию этого важного катиона.