БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 7, с. 1026–1038
УДК 577.114.5; 579.841.3
Биологическая активность (липо)полисахаридов дефектного по экзополисахариду мутанта RT120 − производного штамма Rhizobium leguminosarum bv. trifolii TA1
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: липополисахарид, Rhizobium leguminosarum, 3-дезокси-3-метиламинофукоза, летальная токсичность, ФНО-α.
Аннотация
Изучены химический состав и биологические активности липополисахаридов (ЛПС) Rhizobium leguminosarum biovar trifolii TA1 (RtTA1) и его мутанта Rt120 по межгенной области pssB–pssA, а также деградированных полисахаридов (ДПС), полученных из ЛПС. Полисахаридные фракции исследовали методами метилирования, масс-спектрометрии MALDI-TOF и 1H-ЯМР-спектроскопии. Высокомолекулярная углеводная фракция, полученная из ДПС Rt120 гель-хроматографией на сефадексе G-50, содержала в основном L-рамнозу, 6-дезокси-L-талозу, D-галактозу и D-галактуроновую кислоту, в то время как фракция из ДПС RtTA1 включала в себя L-фукозу, 2-ацетамидо-2,6-дидезокси-D-глюкозу, D-галактуроновую кислоту, 3-дезокси-3-метиламинофукозу, D-глюкозу, D-глюкуроновую кислоту и гептозу. Относительные интенсивности основных сигналов 1H-ЯМР O-ацетильных и N-ацетильных групп составляли 1 : 0,8 и 1 : 1,24 в ДПС Rt120 и RtTA1 соответственно. Интактный ЛПС мутанта обладал в 2 раза большей летальной токсичностью, чем ЛПС дикого типа. Более высокая продукция ФНО-α и IL-6 in vivo, индуцированная у мышей ЛПС Rt120, коррелировала с токсичностью, однако ЛПС мутанта вызывал более слабую секрецию IL-1β и IFN-γ, чем ЛПС RtTA1. Полисахарид, полученный хроматографией на геле Bio-Gel P-4 высокомолекулярного материала из Rt120, был токсичен для опухолевых клеток HeLa, но был неактивен по отношению к клеточной линии нормальных дермальных фибробластов человека. Полисахарид из RtTA1 не проявлял активности в отношении обеих линий. Сильный ингибирующий эффект ДПС мутанта на опухолевые клетки HeLa может быть связан с различиями в моносахаридном составе.