БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 6, с. 799–806
УДК 577.123
СNG сайт-специфичная метил-чувствительная эндонуклеаза WEN1 из проростков пшеницы
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эндонуклеаза растений, пшеница, сайтовая специфичность действия, митохондрии, CNG сайты, WEN1, SAM, S-аденозилметионин, эволюция.
Аннотация
Выделенная из везикулярной цитоплазматической фракции стареющих колеоптилей проростков пшеницы эндонуклеаза WEN1 c кажущейся молекулярной массой ~27 кДа обладает выраженной сайтовой специфичностью действия. Это первый случай обнаружения и выделения сайт-специфичной эндонуклеазы у высших эукариот вообще и у высших растений, в частности. Фермент гидролизует дезоксирибоолигонуклеотиды разного состава по CNG сайтам, расщепляя фосфодиэфирную связь между остатками C и N (N–G, A, C, Т) независимо от близлежащего нуклеотидного контекста, за исключением сочетанияm CCCG. По сравнению с неметилированными субстратами WEN1 предпочтительно гидролизует метилированную λ фаговую ДНК и двуцепочечные дезоксирибоолигонуклеотиды, содержащие 5-метилцитозин сайты (m5CAG, m5CTG). Фермент также способен гидролизовать и одноцепочечные субстраты, однако при этом он с большей эффективностью расщепляет неметилированные субстраты. Обнаружение сайт-специфичной, чувствительной к статусу метилирования узнаваемых сайтов и с модулируемой S-аденозил-L-метионином активностью эндонуклеазы WEN1 у растений пшеницы указывает на то, что у высших растений могут существовать системы рестрикции-модификации генома (R–S) или, по крайней мере, некоторые их элементы.