БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 5, с. 713–723
УДК 577.15
Комплекс пищеварительных протеиназ гусениц Galleria mellonella. Состав, свойства, ограниченный протеолиз эндотоксинов Bacillus thuringiensis
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Galleria mellonella, протеиназы насекомых, сериновые протеиназы, δ-эндотоксины Bacillus thuringiensis, процессинг Cry-токсинов.
Аннотация
Изучен комплекс пищеварительных протеиназ гусениц пчелиной огневки Galleria mellonella. С помощью хромогенных субстратов и ингибиторного анализа установлено, что главную роль в нем играют сериновые протеиназы. Методом зимографии в кишечном экстракте G. mellonella выявлены три анионные и две катионные формы трипсина, а также одна анионная и одна катионная формы химотрипсина. Наиболее активный трипсин был выделен в электрофоретически гомогенном виде, и последовательность N-концевых аминокислот его идентична таковой для зрелого трипсина из Plodia interpunctella. Показано, что экстракт из средней кишки гусениц G. mellonella способен процессировать Cry-белки Bacillus thuringiensis подвида galleriae. В этом процессе участвуют ферменты с триптической и химотриптической активностями, причем активация протоксина Cry9A не является скоростьлимитирующей стадией при токсическом действии этого белка на пчелиную огневку.