БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 4, с. 558–565
УДК 577.151.4
Белок теплового шока DnaK – субстрат бактериальной протеазы ЕСР32, специфически расщепляющей актин
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: протеаза ЕСР32, DnaK, очистка белков, ограниченный протеолиз.
Аннотация
Обнаружено, что бактериальная протеаза ЕСР32, известная своей высокой специфичностью по отношению к актину, расщепляет белок теплового шока прокариот DnaK, относящийся к семейству белков теплового шока с молекулярной массой 70 кДа. Предложен эффективный одностадийный метод очистки DnaK с использованием термообработки. Разработанный метод позволяет получить ~1 мг частично очищенного DnaK из 25 г влажной биомассы бактерий. Получены поликлональные антитела к DnaK. Проведено сравнение катализируемого ЕСР32 протеолиза частично очищенного DnaK и DnaK в составе исходных клеточных экстрактов.