БИОХИМИЯ, 2011, том 76, вып. 3, с. 425–428
УДК 577.152.3
Сигнальная пептидаза Escherichia coli распознает и удаляет сигнальную последовательность ксиланазы из недавно полученного штамма Bacillus subtilis R5
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ксиланаза, Bacillus subtilis R5, сигнальный пептид, MALDI-TOF-масс-спектрометрия.
Аннотация
Ген, кодирующий фермент ксиланазу из Bacillus subtilis R5, содержащую свойственную роду Bacillus сигнальную последовательность, был клонирован и экспрессирован в Escherichia coli. Гетерологическая экспрессия этого гена приводила к продукции рекомбинантного фермента в цитоплазме клеток E. coli и к его последующей секреции в культуральную среду. Активность ксиланазы в культуральной среде повышалась с момента индукции экспрессии и достигала 90% общей активности фермента к 14 ч инкубации. Определение молекулярной массы и N-терминальной последовательности очищенной рекомбинантной ксиланазы показало, что ее природный сигнальный пептид удалялся сигнальной пептидазой E. coli путем расщепления молекулы фермента в месте между остатками Ala28 и Ala29.